我的质粒是6000多bp的,比较大,我想用它做基因转染,实验室有经验的都说太大了,不好转,连接在病毒上比较好转,但是那样

来源：学生作业帮编辑：作业帮分类：综合作业时间：2024/05/27 21:40:42

我的质粒是6000多bp的,比较大,我想用它做基因转染,实验室有经验的都说太大了,不好转,连接在病毒上比较好转,但是那样的话,费用会贵得多,需要一万多块钱.大家有没有比较好的建议啊?用什么转染方法,什么转染试剂比较容易转进去?并且要转的细胞是免疫细胞,不容易提取和培养,转染试剂一般还都有细胞毒性,易杀伤细胞.哎,都急死我了.

6kb以上的确有点大,会影响转染效果
1.用脂质体和阳离子转染试剂.现在很多公司都有卖转染试剂的,你可以直接买转染试剂来进行转染.比如说最经典的lip2000,或者吉满生物的效果还行,主要是便宜.
2.可以尝试使用电转,但是对细胞伤害较大,需要专门的仪器.
3.慢病毒和腺病毒包装现在价钱在一万不到一些,主要还是看公司报价,你可以谈价钱.

事先申明一下,我平时比较会想一些比较奇怪的问题,这已经困扰了我好久了,搞得我压力大死,好不容易现在有点好转没以前那么会想 tpo做的我要吐啦!还是没有好转! 质粒转染细胞不表达的问题~ 前段时间我得了急性盆腔炎.在医院打了一段时间点滴后渐好转,后回家自行服药.先吃的是盐酸左氧氟沙星片(说明书上有说它治疗盆想买个hermes birkin黑色包我比较喜欢大包但是别人都说40的太大了 35就好比较犹豫如果我把目的基因连接到质粒载体上,这个载体质粒又有多个启动子,我怎么知道它用那个启动的呢包装反转录病毒（如慢病毒）时采用多质粒系统共转染细胞,那么包转好的病毒基因组是RNA吗?怎么来的? 大山羊好转的情况下是什么特点呢质粒转染细胞第一次预实验转染效率较好,再做就转不进去了或者转染效率不到5%,是质粒反复冻融的问题吗? 如题,细胞转染质粒24小时后能做免疫荧光实验吗?我们实验室一直是48小时候做,但是由于时间又冲突,我想提前做了,想问下转环境污染问题的解决.预计环境何时有好转? 肾功能不全失代偿期好转的可能性有多大?