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microRNA茎环引物及PCR上下游引物设计和扩增原理

来源:学生作业帮 编辑:作业帮 分类:综合作业 时间:2024/05/20 12:36:12
microRNA茎环引物及PCR上下游引物设计和扩增原理
我在文献上看到一些用茎环引物反转录microRNA时,接下来的PCR的上游引物是包含了microRNA的5‘端一部分序列,而下游通用引物则为茎环上的一部分序列,那到底扩增产物是哪部分呢?这些引物的碱基跟RT模板是一模一样的,而不是互补配对,那接下来怎么扩增呢?茎环引物在高温时是会揭开成单链的吧?正向引物可以结合上去,但是我不明白反向通用引物是怎么结合的?还是先要正向引物合成一段序列,反向引物再与刚合成的序列结合?
这个和普通的反转录pcr一样啊,反转录成cDNA第一链,单链再做pcr扩增,逆向引物当然是和反转录引物部分相同,而不是互补咯.