单克隆抗体的制备筛选出的杂交瘤细胞应该直接在体外培养还是注射到小鼠腹腔内增殖?
来源:学生作业帮 编辑:作业帮 分类:生物作业 时间:2024/05/21 11:01:00
单克隆抗体的制备
筛选出的杂交瘤细胞应该直接在体外培养还是注射到小鼠腹腔内增殖?
筛选出的杂交瘤细胞应该直接在体外培养还是注射到小鼠腹腔内增殖?
单克隆抗体制备有两种方法.
第一种方法是:增量培养法,即将杂交瘤细胞在体外培养,在培养液中分离单克隆抗体.该法需用特殊的仪器设备,一般应用无血清培养基,以利于单克隆抗体的浓缩和纯化.
第二种也是最普遍采用的方法是小鼠腹腔接种法.选用BALB/c小鼠或其亲代小鼠,先用降植烷或液体石蜡行小鼠腹腔注射,一周后将杂交瘤细胞接种到小鼠腹腔中去.通常在接种一周后即有明显的腹水产生,每只小鼠可收集5~10ml的腹水,有时甚至超过40ml.该法制备的腹水抗体含量高,每毫升可达数毫克甚至数十毫克水平.此外,腹水中的杂蛋白也较少,便于抗体的纯化.接种细胞的数量应适当,一般为500000/鼠,可根据腹水生长情况适当增减.
第一种方法是:增量培养法,即将杂交瘤细胞在体外培养,在培养液中分离单克隆抗体.该法需用特殊的仪器设备,一般应用无血清培养基,以利于单克隆抗体的浓缩和纯化.
第二种也是最普遍采用的方法是小鼠腹腔接种法.选用BALB/c小鼠或其亲代小鼠,先用降植烷或液体石蜡行小鼠腹腔注射,一周后将杂交瘤细胞接种到小鼠腹腔中去.通常在接种一周后即有明显的腹水产生,每只小鼠可收集5~10ml的腹水,有时甚至超过40ml.该法制备的腹水抗体含量高,每毫升可达数毫克甚至数十毫克水平.此外,腹水中的杂蛋白也较少,便于抗体的纯化.接种细胞的数量应适当,一般为500000/鼠,可根据腹水生长情况适当增减.
单克隆抗体的制备筛选出的杂交瘤细胞应该直接在体外培养还是注射到小鼠腹腔内增殖?
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