某一基因序列 由于只能查到人的和鼠的 请问 怎么通过已知的人和鼠的基因序列 blast出相应猪的基因序列
来源:学生作业帮 编辑:作业帮 分类:综合作业 时间:2024/05/11 19:49:21
某一基因序列 由于只能查到人的和鼠的 请问 怎么通过已知的人和鼠的基因序列 blast出相应猪的基因序列
将人和猪的该基因序列或氨基酸序列进行同源性比较,找出同源性较高的保守区,以此保守区与genbank中鼠的基因序列或氨基酸序列进行比较,找出同源性较高的区域,对该区域进行分析,找出含有该区域序列的ORF即可.
再问: 非常感谢你的回答 可是在NCBI上只能搜到人和鼠的基因序列 没有猪的 我是要扩猪的该基因的启动子
再答: 如果没有猪的该基因序列的资料,也可以做,但比较麻烦了。建议采取的方法是,提取猪的mRNA,反转录成cDNA后, 方法1.以人和鼠该基因的同源序列设计引物进行PCR扩增,具体可采取5'或3'RACE的方法。 方法2.建立cDNA文库,用以人和鼠该基因的同源序列设计探针,与文库进行核酸杂交,筛选出阳性克隆进行测序。 通过上述2方法得到的可能不是该基因的全长,而是部分基因,但可以以此为线索,继续获得该基因的全基因及其两侧的序列,然后用软件寻找启动子序列,并用启动子探针载体检测或验证启动子的活性。
再问: 非常感谢你的回答 可是在NCBI上只能搜到人和鼠的基因序列 没有猪的 我是要扩猪的该基因的启动子
再答: 如果没有猪的该基因序列的资料,也可以做,但比较麻烦了。建议采取的方法是,提取猪的mRNA,反转录成cDNA后, 方法1.以人和鼠该基因的同源序列设计引物进行PCR扩增,具体可采取5'或3'RACE的方法。 方法2.建立cDNA文库,用以人和鼠该基因的同源序列设计探针,与文库进行核酸杂交,筛选出阳性克隆进行测序。 通过上述2方法得到的可能不是该基因的全长,而是部分基因,但可以以此为线索,继续获得该基因的全基因及其两侧的序列,然后用软件寻找启动子序列,并用启动子探针载体检测或验证启动子的活性。
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