镍柱纯化时,镍离子被洗脱下来掉到蛋白溶液里对蛋白有影响吗?透析时只有透析掉咪唑为什么不说把镍离子透析

来源：学生作业帮编辑：作业帮分类：语文作业时间：2024/05/07 03:55:09

镍柱纯化时,镍离子被洗脱下来掉到蛋白溶液里对蛋白有影响吗?透析时只有透析掉咪唑为什么不说把镍离子透析
镍离子别洗掉了所以才会有镍柱重生,重新挂镍离子上去吧!

Ni离子是重金属,进入蛋白中肯定是有影响的,如果这个蛋白是用于人体或者动植物的肯定是不行的.Ni柱重新挂Ni确实是必须要脱Ni的,但一般是先用咪唑把蛋白全部洗下来后才脱Ni的,所以一般不太可能进入蛋白溶液中,如果进入了你可以重新用另一根柱子（这个柱子得保证结合你的蛋白）,将蛋白溶液穿过这个柱子,让蛋白结合至柱子上,而Ni则和流穿液一起流穿,在把蛋白洗脱下来即可；至于透析,没试过,不好说,但Ni毕竟是离子,小分子,应该能透析掉的啊.
再问：谢谢你的回答！我过镍柱时一个新柱子只用了三次，里面原本蓝色的介质就变得白白的，一个柱子一般能用几次？其实，柱子在每次使用的时候随着里面溶液（平衡液、洗涤液、蛋白液等）的加入都是会有所损失（流走）的，只不过是有的用的时间长有的用的时间短而已，对吧？
再答：如果是对同种蛋白的话，一个镍柱能用5-6次，但如果不是同种蛋白的话，建议还是每次换蛋白的时候脱Ni，挂Ni，这样柱子的柱效要好很多，因为Ni柱毕竟不能用碱洗，少量蛋白和杂质还是会沉积在上面的，会影响柱效的。另外，Ni离子理论上应该是不会随着一般的缓冲溶液和蛋白溶液所洗下来的。

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