怎样提纯编码某种蛋白质的cDNA,并用实验证明所克隆的cDNA是正确的?

来源：学生作业帮编辑：作业帮分类：综合作业时间：2024/05/12 06:49:26

怎样提纯编码某种蛋白质的cDNA,并用实验证明所克隆的cDNA是正确的?
原题是：How to purify a cDNA for a protein found (ProA) in human milk?Include an experiment to demonstrate you truly have cloned a correct cDNA.

不知你的目的是什么,估计你应该是检测某种细胞或组织中是否表达这种蛋白!首先你得知道此种蛋白质的核苷酸序列,从而设计引物,然后提取此细胞中的总mRNA,依此引物进行反转录特异性扩增你需要验证的蛋白质DNA序列,最后电泳检测,进行胶回收就可以纯化了!
若要实验证明所克隆的cDNA是正确的,只需对纯化的DNA进行测序就可以验证了!
再问：看下原题，我也是不大懂题目的意思
再答：看原题好像是要做一个实验确定人乳汁中是否含有ProA蛋白成分。ProA蛋白为一种已知的蛋白（为一种胞外蛋白酶），能在NCBI中下载其基因序列；而人的乳汁是在乳腺中分泌的，这样就可以设计引物从乳腺细胞中的mRNA中反转录出CDNA。另外要验证的话跑电泳根据扩增条带大小可粗略判定，要确认直接测序就行！
再问：可不可以将主要步骤分别列出来
再答：上面的回答基本上就是主要的步骤了啊！实际上自己对这道题的理解也不一定是正确的！看还有别的人能否给出不同的理解！
再问：谢谢你了，我觉的题目就是要你合成能表达那种蛋白的cDNA吧，然后验证一下

怎样提纯编码某种蛋白质的cDNA,并用实验证明所克隆的cDNA是正确的? 生物基因工程这样包含着细胞全部mRNA信息的cDNA克隆集合称为该组织细胞的cDNA文库这段文字中的克隆集合是什么?是所 cDNA感染性克隆的概念和原理设计克隆一个基因的CDNA序列的实验!注意是实验哦!周四之前!谢谢,满意再+50! 我想做胰岛素导入大肠杆菌的基因克隆实验.在ncbi中查找到了cdna,准备跑pcr,这个时候需要提取出cdna模请设计几种方法分离蛋白质基因的cDNA 克隆出牛的leptin基因的cdna全长序列?（用race）用于构建cDNA文库的载体与普通克隆载体的区别 RNA是如何反转录成cDNA的?过程和原理怎样? cDNA与mRNA是相同还是互补的序列? cDNA文库问题!cDNA文库包括该种生物：A某些蛋白质的结构基因B所有蛋白质的结构基因C所有结构基因 cDNA文库与基因组文库的区别