作业帮western可检测到的蛋白量
来源：学生作业帮助网 编辑：作业帮 时间：2024/05/17 01:25:28
可以.这个是流式细胞仪一个常见的应用.上流式细胞仪以前,需注意的是1.细胞打散到单细胞的悬液,没有聚团成块.如果有顾虑的话用纱网过滤一次才用.2.细胞悬液的浓度不能过高和过低.详请参考你的仪器说明建议
蛋白质探针只能检测有某段基因且以表达,在染色体上的位置搞不出.检测基因在染色体上的位置很复杂,那是高等的事.
WB只是一种半定量手段,可以用比较两种蛋白表达量,除非你先用标准品跑胶做出一个标准曲线
免疫印迹如果结合凝胶成像的话（带相关分析软件）,他是可以定量的,但多用来做体外培养的细胞；免疫组化就是针对组织切片的,可以定性、半定量（即看出个大小的关系）.如果你要是做动物实验组织的话,最专业也是最
当然可以只要你包被的抗原可以与目的蛋白反应就行再用蛋白免疫一种实验动物得到抗体作为结合酶标二抗的底物这样就完成了一个夹心ELISA
看你的flag抗体是否有问题,我是做抗体生产的,原来开发flag抗体时就会对其进行C端、N端、M端的Qc检测,正常情况下三端都需要有识别,我担心你的抗flag抗体有可能不识别N端,还有一种可能就是你的
一抗要抗小鼠要适合做western二抗要抗一抗,要有HRP不知道你的什么融合蛋白,你也可以抗你融合上去的tag.
转录水平初步检测,就用半定量RT-PCR；精确的定量要做Real-TimeRT-PCR蛋白水平做Western.最好两个多要做,因为转录水平高,不一定蛋白水平就一定高
ABCD都是SouthernBloting的事,E是NorthernBlotting,Western只能查蛋白质,也就是基因表达的结果.
1动物传递实验2组织印迹3斑点印迹4免疫印迹5酶联免疫吸附实验6免疫组化7毛细管SDS凝胶电泳8荧光标记肽链的毛细管电泳免疫测定法9双色强荧光目标扫描法……
当然了,WB是定量的,免疫组化有一定的主观因素
1.westernblot每孔上样总量15-50ug大部分蛋白能做出来,跟蛋白质表达量、分子量、抗体效价都密切相关.2.组织一般取200mg,匀浆后蛋白常能得到几百ug,跑十块胶足够.
做western,抗体很重要.首先看你要用什么材料做实验,人细胞?还是其他动物的?如果做人细胞,那就要选用鼠抗人,或者兔抗人的抗体.抗原是人的蛋白,抗体来自于鼠或者兔,在有单抗和多抗的情况下,尽量选择
凯氏定氮法网上没找到,就自己打了一份饲料中纯蛋白质（真蛋白）的测定一、测定原理饲料蛋白质经沸水提取并在碱性溶液中被硫酸铜沉淀.过滤和洗涤后,可将纯蛋白质和非蛋白质含氮物分离,再用凯氏定氮法测定沉淀物中
加抗体了之后是不是没用缓冲液充分洗涤
可以细胞内染色技术细胞因子胞内染色依赖于预先对细胞进行固定、破膜处理后鉴定细胞因子特异性抗体染色的荧光信号.
30是指内参上样量是30微克的情况下,具体上多少就是多少.灰度值差异很大,所以不能直接用来分析.要分析就是用比值分析.用比值来分析比较下实验组和对照组就可以避免出现绝对灰度值.
多数抗体只识别抗原表面某几个多肽片段,所以它们和抗原的结合不受抗原变性影响,甚至很多时候有些抗体只识别变性的抗原.当然,有些抗体的抗原位点就与蛋白质空间结构有关,抗原变性后就无法和这些抗体结合.通常情
个人认为：1加样量的变化2一抗二抗的浓度变化以及其洗脱时间的影响3曝光时间（影响最大）
1,通过电镜或X-射线衍射等方法对其结构进行分析.2,功能分析：检测能否与其受体或配体结合.3,酶解法再问：请问能详细解释下吗，多谢了再答：蛋白在电场中的迁移速率与其所带电荷以及分子量大小有关，设计实