RNA提取电泳条带在500bp左右是什么带
来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/05/17 02:31:00
很小的,修芬兰相当于300BP,在不到一百BP左右?是一堆的,一看就能看出来的.提质粒提不好经常会有那东西的.
这个要看条带的位置了,如果是在加样孔附近的话就是蛋白质污染了,你最好把电泳图片附上来,我再给你看看
蓝色条带分别是溴酚蓝和二甲苯青FF(请注意不是二甲苯氰).溴酚蓝在琼脂糖中的泳动速率约与长300bp的双链线状DNA相同,而二甲苯青FF的泳动则与长4kb的双链线状DNA相同.希望能够对你有所帮助.
核糖体RNA的含量最高,因此这三条带最明显,可是其实不只是这三条,可能你们实验条件有限,只看到3条了,我实验中有时候能看到很多条
有没有可能,有环状超螺旋DNA、开环DNA与变性的线型DNA三种空间构想,导致跑出3条带
条带显示的亮度是你一定体积上样量的DNA总量,而你吸光度测定是浓度,两个比较不能说明什么,电泳只是体现有没有和相对其他条带DNA的大小和量
生物体内一般含有核糖体RNA(rRNA)、信使RNA(mRNA)、转运RNA(tRNA)三种主要的RNA,其中rRNA含量最多,提取组织总RNA所得最多的就是rRNA.真核生物中含有5S、5.8S、1
用这个方法复溶蛋白时很难完全溶解掉,样品处理很是个问题,应该是蛋白浓度不高.我做过类似的也是用这个方法,电泳出条带很浅甚至没有,很郁闷.再问:那你后来是怎么解决这个问题的呢?是bufferB溶解的时候
应该是DNA污染~你用DNase处理下RNA提取物再用EDTA终止DNase活性~在跑下看看~一般都是DNA污染~才会在那个位置~
因为这两种RNA的相对含量啊亲.那两条带一条在3.8kb,一条在2kb,都是rRNA的一部分,本来的相对含量大概就是1:2.另外,要达到这两条带1:2的比值比较难,只要最下面弥散的带不多质量就还可以,
首先,看你提取什么RNA,如果你提取血液里面的小RNA那没有条带是正常的,因为小RNA没有结合EB的结构,所以电泳你看不到什么东西.其次,如果你提取细胞总RNA的话,就可能如一楼的朋友回答的那样,但不
电压和电泳时间调整过没有?有没有都跑出去了?你是用什么跑的?以前做过没有?调整一下浓度看看(琼脂糖或者丙烯酰胺的浓度),个人感觉胶没做好的可能比较大.
核酸电泳时使用的是EB染料吗?如果提取的样品中还有较多的RNA,RNA分子量较小,电泳时跑在前面,会结合较多的EB,影响DNA的观察,建议RNA酶37度消化30分钟.再问:用的goldview。再答:
非特异性扩增.建议试试:1提高退火温度,或加点DMSO2重新设计引物3做分段PCR,再连起来4全基因组合成
这就是特异性不好,建议做如下改进:1,控制好RNA提取过程,尽量减少RNA降解和基因组DNA的混入;2,严重怀疑你的模板量过高,把模板稀释10-1000倍的梯度试试;3,做二阶段温度pcr,先用稍高退
marker能看到吗?marker很清楚,电泳就没问题.说明没有DNA.可能提取失败,沉淀也许是盐.测测浓度吧,应该很低.看看提取程序是不是有问题.
RNA在提取过程中和保存期间非常容易被RNA酶降解,提取过程得非常小心,保存期间也得加RNA酶抑制剂,不知道紫外分光光度计检测时含量和纯度如何,及时被降解,也应该有拖尾才对,可能是浓度太低,建议加大上
5s是不是很亮的一片拖尾,如果是的话,就是降解了.如果你是做RT,不妨接着试一次,记得设好阴性和阳性对照;如果做Northern,那就重提吧.鸡肝RNAase多,提取时小心些.
很正常可能是DNA