pcr扩增1200大小的片段怎么设置

因为GC之间有三个氢键,而AT之间只有两个氢键,因此GC含量越高,要打开氢键的能量就要求越大,即退火温度越高.PCR退火有的是根据GC含量估算Tm更详细说明次料：PCR引物应该保持合理的GC含量.含有

第二次比如目的基因是300bps,母链DNA2000bpsforwardprimer从母链第25碱基开始由5'-3'开始复制,backwardprimer从第325由3'-5'开始反向复制.第一次复制

当然可以咯,不过我没明白为什么上游引物GCrich跟分两段扩增有什么关系,1.2K一次扩增是完全没有问题的,如果上游引物出现GCrich的情况,那么可以考虑在更加上游的地方设计引物啊,在这个基因外测的

没有必要纠结于这些概念目的基因,就是你要研究的那个基因.除非你要克隆基因全长,不然RT-PCR就是用来扩增一小段（所谓目的基因片段）再问：我想做rt-pcr但是我找了好长时间也没有找到：狗β3-ar引

pcr扩增出来就是目的基因.假设这是一段基因（两条链一个道理我就只表示一条了）--------------+————————=-------------------中间是目的基因,=和+表示它的两端,

中间有一段未知没有关系啊,从两头已知的里面设计引物,然后进行PCR,克隆到载体上,或者PCR产物直接送去测序,测序结果blast即可

我个人感觉对PCR影响最大的是模板质量和退火温度,至于其他的影响因素那就太多了,模板纯度浓度,引物质量,体系中的物质（buffer,酶,Mg2+,dntp浓度）,退火和延伸温度.一般来讲,引物从ref

以PCR产物为模板,只要引物,体系对,怎么P怎么出.你的模板就是PCR产物,浓度再低也没事,稀释100倍没问题.没什么要注意的

解题思路：PCR技术解题过程：varSWOC={};SWOC.tip=false;try{SWOCX2.OpenFile("http://dayi.prcedu.com/include/readq.p

如果这两个引物特异性很好,扩出来的不是非特异性片段,那么大小应该是一样的,只不过若有等位基因存在的话,会出现个别碱基缺失,也就是会有几b的差异.

能说下原题么、

貌似没听说过,你的酶和dNTP买回来之后说明书上会给出你合适的体系,那个dNTP绝对都是足量的.

非特异性条带的出现,其原因：一是引物与靶序列不完全互补、或引物聚合形成二聚体.二是Mg2+离子浓度过高、退火温度过低,及PCR循环次数过多有关.其次是酶的质和量,往往一些来源的酶易出现非特异条带而另一

PCR非特异性扩增指的是你进行PCR所扩增出来的条带不是所要的,引物与模板在非目的条带处有错配,导致延伸产物不是目的条带.非特异性扩增在琼脂糖电泳时可以看到在目的条带外出现了其他条带.引起非特异性扩增

.PCR每分钟能扩增多长的片段和PCR仪没有关系,只和你PCR体系中的酶和buffer有关.再问：那到底每分钟能够扩增多少bp的片段啊再答：你看看你用的是什么酶，找找那酶的说明书，上面肯定写了再问：酶

PCR的反应在进行时,的确会产生不需要的片段.实际应用的时候,我们都会在需要的基因片段上染色或者标记萤光.由于价格上的原因,目前国外的实验室都采用染色的方法.而且随着反应的进行,由于大量引物的存在,需

应为PCR扩增出来的是混合物,酶切回收后才基本是纯的目的片段.载体一般不用PCR扩增,一般是质粒来源,也需要用切口一致的酶消化回收.之后连起来就好了再问：那PCR扩增出来的混合物里除了目的片段还有什么

pfudnapolymerase是目前已知dna合成准确性最高的酶.在正常的pcr扩增程序下,其扩增产物的错误率为4000bp中发生一个.错误率仅为taqdnapolymerase的1∕7--1∕10

可分为长产物片段和短产物片段两部分.短产物片段的长度严格地限定在两个引物链5'端之间,是需要扩增的特定片段.短产物片段和长产物片段是由于引物所结合的模板不一样而形成的,以一个原始模板为例,在第一个反应

1退火温度不合适2引物不合适3模板有问题4酶由问题