作业帮PCR合成质粒计算拷贝数
来源：学生作业帮助网 编辑：作业帮 时间：2024/05/10 19:58:19
可以的.这个方法就是用来定量DNA的
质粒转化应该比较容易,要检查一下引物对不对.其次是你的模板够不够,因为农杆菌中质粒拷贝数很低.可以提出质粒后再来PCR再问：嗯，载体上没有通用引物，我是用基因特异引物做的。摇菌时我要了24个小时呢，本
ThisaritclethroughthestepssuchasPCR,transformation,distillingplasmid,EcoRI,connectingmainlinks,purif
就是同一个基因重复的次数,因为在染色体组中一个基因可能在不同地方都有存在,每一个存在就是一个拷贝
不管酶切还是PCR,都是间接的结果.要确定克隆的正确,一定要测序的啊.你测个序,问题就迎刃而解了.到底是什么问题也就清楚了.再问：我前些天去遇到一样的问题，酶切鉴定正确，但测序后什么也不是呢再答：所以
需要知道DNA浓度、DNA片段长度.即可换算成拷贝数1A260吸光度值＝dsDNA50ug/ml=ssDNA33ug/ml=ssRNA40ug/ml核酸浓度＝(OD260)x(dilutionfact
当然属于了,克隆的意思就是中文的“复制”,PCR的相关技术就称作分子克隆,molecularcloning.只要能称得上复制的都属于广义的克隆,包括植物的扦插,无性生殖,DNA分子的复制等等.
长片段用重组质粒克隆法.因为一般PCR无法扩增大至8Kb以上的片段.
拷贝数就是指该基因在某一生物群体或个体中存在的个数.单拷贝就是该基因在基因组中只有一个,多则指有多个,一般来讲研究基因的拷贝数要用southernblot来鉴定
就是某基因在基因组上的数目.比如recA基因在细菌基因组上有多个,就叫做多拷贝,大肠杆菌oriC也有多个,也叫多拷贝.而基因组里只有1个的,就叫单拷贝.
你要扩大的是质粒不是PCR片段,直接PCR哪能扩那么大的质粒啊,而且质粒还是环形的,怎么做PCR,所以当然是摇菌啦再问：酶切后去PCR，2kb以内的质粒应该是没问题的吧？不过确实挺麻烦再答：哪有2KB
你这第一块是DNA第二块是质粒?怎么都有两条带?而且看你PCR结果基本没有扩出来啊,也不知道你要问什么问题.再问：第一个是质粒，第二个是DNA，pcr确实没扩出来，就分析一下这几个图结果的原因(跑胶的
2-ΔΔCt法.定量的作用是比较两个或多个样本（前提是细胞数目要相等）基因表达量差异的,基因拷贝数/内参拷贝数只是一个样本的相对定量值.内参的作用只是消除样本间细胞数目的差异.
3.028×1011（10的11次方）就是3.028E11E就是10的几次方的意思.
http://www.uri.edu/research/gsc/resources/cndna.html试试这个网站,很不错的.直接给你算出来
你那叫弥散性条带.你上样量太多了吧.
要是实际应用的话,你做个链接试试就知道了呗或者电泳的时候点一个没切过的做下对照,迁移率会有差别
1OD值相当于50μg／mL双螺旋DNA把你的样品检测OD得x换算你的DNA分子量（是双链的）M拷贝数=x*0.05/M*6.23*10(23次方）
上海基康