pcr使用mix后的产物跑琼脂糖电泳需要加loading buffer吗

什么是不清楚?如果有拖带说明你电压太高了.100V跑吧如果是太淡看不清说明你点样的量不够或者PCR扩增出的浓度不高

检验一下产生的扩增后的片段的长度和浓度~要是片段长度为目的片段长度或者相差不多的话,就说明扩增成功了~有的时候扩增完电泳会发现片段长度与目的基因的差了好多,那就是有问题啦~而且有的时候还会出现多条带等

博凌科为的这款产品是同类产品中比较不错的.它是在高离序盐存在的情况下,DNA片断选择性的吸附于离心柱内的硅基质膜上,再通过一系列快速的漂洗－离心的步骤,去蛋白液和漂洗液将引物、核苷酸、蛋白、酶等杂质去

PCR产物纯化试剂盒去除的是PCR反应体系中的离子、dNTP、引物以及聚合酶,收集其中的DNA片段.这只适合于几乎没有非特异性条带的PCR产物的收集.如果你的PCR产物具有非特异性条带,那么一定需要使

是的啊,可以用PCR产物做模板再PCR一次.再问：那是用PCR反应体系中PCR产物做吗还是需要把PCR产物提纯后再重新加入PCR反应体系这种二次PCR效果怎么样十分感谢再答：是啊，可以不用提纯的，因为

问题很多啊.或者是你的PCR仪需要进行荧光校准（如果其他探针也没有信号的话）,已经不能收集荧光信号了.或者是你的探针本身就有问题,合成的不好,信号很弱甚至没有信号.或者是你的探针存放时间太长,存放条件

在烧杯里加上水,把平板计数琼脂放在里面,加热直至融化.或把平板计数琼脂放在微波炉里加热

实验有没有跑标准分子量DNAMarker?如果Marker电泳后条带正常,那么就是PCR无扩增条带；如果Marker也看不见,那就是配胶有问题,或者配胶用的试剂（比如染料）有问题

能说一下你这样酶切的目的么?40bp和36bp的条带,只相差4个bp,基本上在琼脂糖胶上就不用考虑分清楚了.最好使用聚丙烯酰胺凝胶,很多用变性聚丙烯酰胺凝胶,可以分离到碱基数相差很少的条带,而某些变性

不用加.如果自己混PCR的各种料,就要加.

原理：是来至于双脱氧链终止法——现在应用最多的核酸测序技术,由Sanger等1977年提出：模板经过测序PCR反应后形成3'末端带有荧光标记（早期用同位素标记）的相差一个碱基的不同长度的产物,再根据每

设置很简单的,一般不会出什么差错.主要是你的退火温度、循环时间啊什么的是你所要设置的.

你这第一块是DNA第二块是质粒?怎么都有两条带?而且看你PCR结果基本没有扩出来啊,也不知道你要问什么问题.再问：第一个是质粒，第二个是DNA，pcr确实没扩出来，就分析一下这几个图结果的原因(跑胶的

首先要看你的条带是否清晰,虽然亮度不够但是清晰度应该高,没有拖尾没有非特异条带和引物二聚体,如果以上都没有,仅仅是目标条带不够亮的话,我觉得你可以将25微升体积同比放大至50微升反应体系,相应的制胶的

“从头拖到尾,另外一对引物就能做出来”说明不是引物之间形成二聚体,而是第一对引物的设计有问题（特异性很差）.如果一定要扩增那个区,建议引物的位置向两边放一放.如果你没有好的设计软件,建议到Primer

如果你切的是PCR产物的两端,那么跑胶是看不出来区别的.选择这样只是因为方便,酶切的效率要取决于保护碱基、酶的质量等等,一般根据经验切完之后,挖胶回收,如果产物带很特异的话,直接PCR产物回收也可以（

这个看上去像是你在做梯度PCR,所以有很多条带是弥散状的,你可以把比较清晰的条带回收回来,作为模板,利用你之前做梯度得到的优化后的PCR条件再进行一次PCR,看效果如何.补充：这样的话,可能是你不同样

非特异性条带的出现,其原因：一是引物与靶序列不完全互补、或引物聚合形成二聚体.二是Mg2+离子浓度过高、退火温度过低,及PCR循环次数过多有关.其次是酶的质和量,往往一些来源的酶易出现非特异条带而另一

太大严重影响扩增效率,一般为70-200bp.

可分为长产物片段和短产物片段两部分.短产物片段的长度严格地限定在两个引物链5'端之间,是需要扩增的特定片段.短产物片段和长产物片段是由于引物所结合的模板不一样而形成的,以一个原始模板为例,在第一个反应