pcr产物直接纯化
来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/05/14 15:18:06
按理来说是不影响的,因为loadingbuffer里面主要是染料和比水重的成分,这样方便跑胶.你要是不放心的话就把产物都跑胶了,然后利用胶回收试剂盒来做.
首先你要有你目的产物和测序的DNA序列在网页最下端第二行有AligntwosequencesusingBLAST(bl2seq),点击进入看到有Sequence1和Sequence2,这里面分别输入你
这个是可以的,只是效率不高
使用标准浓度内参.
当然可以的.
博凌科为的这款产品是同类产品中比较不错的.它是在高离序盐存在的情况下,DNA片断选择性的吸附于离心柱内的硅基质膜上,再通过一系列快速的漂洗-离心的步骤,去蛋白液和漂洗液将引物、核苷酸、蛋白、酶等杂质去
PCR产物纯化试剂盒去除的是PCR反应体系中的离子、dNTP、引物以及聚合酶,收集其中的DNA片段.这只适合于几乎没有非特异性条带的PCR产物的收集.如果你的PCR产物具有非特异性条带,那么一定需要使
损失量很大.有大片段的纯化试剂盒购买的,应该用那种,效果好,我记得上海生工或者英骏之类的都有卖.泥样?腐殖质含量太高?如果是这样,应该在提取DNa之前脱腐处理,不过要控制好损失.具体的方面很多.腐殖质
能说一下你这样酶切的目的么?40bp和36bp的条带,只相差4个bp,基本上在琼脂糖胶上就不用考虑分清楚了.最好使用聚丙烯酰胺凝胶,很多用变性聚丙烯酰胺凝胶,可以分离到碱基数相差很少的条带,而某些变性
1一般不需要,你可以比对你用的高保真酶的buffer和Taq酶的buffer,要加也只能加差异的部分,如果直接加buffer里面离子浓度肯定都不对了;2都可以,不过我觉得还是应该在充分延伸后暂停或重新
ShrimpAlkalinePhosphatase虾碱性磷酸酶Shrimp是来源,因为酶的提取来源是虾.AlkalinePhosphatse是碱性磷酸酶,简称就成虾碱酶了
原理:是来至于双脱氧链终止法——现在应用最多的核酸测序技术,由Sanger等1977年提出:模板经过测序PCR反应后形成3'末端带有荧光标记(早期用同位素标记)的相差一个碱基的不同长度的产物,再根据每
你让公司测通不然最多只能测1000左右的序列而且只有不到800的测序是靠谱的后面的都不靠谱再问:测出1000bp,前面20bp左右序列不太一样,后面都是一样的,还有测通是什么意思,全部的序列都能测出吗
因为你做pcr和酶切都会引入很多试剂啊离子啊什么的可能影响后一步实验而且你做酶切后不纯化的话切下来的片段还在那里可能发生自连
第一次PCR产物不要做任何处理,直接吸取1微升做第二轮PCR的模板.第二轮PCR过后再跑胶回收你的目的条带.外引物不在你的目的基因上,而在你的目的基因两侧.所以你设计外引物时是从一个很宽泛的范围内寻找
如果你切的是PCR产物的两端,那么跑胶是看不出来区别的.选择这样只是因为方便,酶切的效率要取决于保护碱基、酶的质量等等,一般根据经验切完之后,挖胶回收,如果产物带很特异的话,直接PCR产物回收也可以(
楼上说的是一方面.PCR产物测序也是可以的,可以送粗样,也就是不纯化的,也可以送纯化好的.但很多公司测的不是很好,所以一般建议转到克隆载体中保存了送菌液或质粒测序.PCR产物纯化是去除多余的dNTP和
博凌科为的产品都挺好的,很多实验室都在用,这个品牌挺值得信赖的!
你需要保存多久?我最多放过两三天,没问题再问:我周三晚上扩增出来的,结果给忘记放冰箱了,刚刚才放进去,后边要做DGGE,还可以用么?再答:不好意思DGGE实验我没有操作过。但是从理论上来说,2天不会降