作业帮pcr 中10*buffer 如果加错了是不是就不能出结果了
来源：学生作业帮助网 编辑：作业帮 时间：2024/05/18 02:33:10
这篇文章有详细描述：http://www.springerlink.com/content/h083177466217382/引物OY1(AATAACTTTTCGAATCGCAT)OY2(AAGACT
有白色泡沫是正常现象,应该是没有完全解冻.主要是有些buffer里面有BSA
按理来说是不影响的,因为loadingbuffer里面主要是染料和比水重的成分,这样方便跑胶.你要是不放心的话就把产物都跑胶了,然后利用胶回收试剂盒来做.
镁离子在酶催化过程中,结合到酶－底物结合体上,从而使催化反应的活化能更加降低.使得反应能够进行.
10xPCRbuffer:500mMKCl100mMTris-HCl(pH8.3)15mMMgCl2Somehas(NH4)2SO4aswell.dependsonthecompany
PCR反应的缓冲液的目的是给TaqDNA聚合酶提供一个最适酶催反应条件.目前最为常用的缓冲体系为10-50mmol/LTris-HCl(pH8.3-8.8,20℃)Tris是一种双极性离子缓冲液,20
这个是可以的,只是效率不高
具体不同我不知道,但是我可以提供如下信息：如果你的那个taqbuffer是内切酶的buffer（因为有种限制性内切酶就叫taq）,一定不能用于pcr如果你的那个taqbuffer是聚合酶buffer,
语法里没有这个关键字.随便一个变量或者函数,或者任何可以自由命名的东西,都可以叫buffer.根据名字的英文含义来说,应该是个缓存区.具体含义可以由程序员任意赋予.
博凌科为-为你不应该啊,要是没混匀,怎么可能目的条带出来了,你再跑一遍混匀试试看看就知道是不是混匀的问题了
说明书上应该写得很清楚.一般买来分装的PCR酶和BUFFER,如果用的次数不多,可以当时用,当时混合；如果经常使用,可以在使用前,先将BUFFER混合起来,即将镁离子、dNTP等混合起来,酶除外.酶当
不用加.如果自己混PCR的各种料,就要加.
看你的2XPFU是什么形式,如果是mix的形式,一般已经有染料在里面了,可以看到mix的溶液就是蓝色,这样的话,样品可以直接上样的.但是如果你加的溶液都是透明的,完成后还是需要加loadingbuff
对,鉴定胶,5*,2-5ul产物,2ulbuffer,多一点少一点问题不大.
lysisbuffer中加咪唑的目的是与杂蛋白竞争,使那些与填料亲和力弱的杂蛋白不能挂柱；washbuffer中加咪唑是为了洗去大部分已挂柱的杂蛋白（也会洗去少量目的蛋白）；elutionbuffer
应该没有问题确认一下你的GCbuffer里边的试剂的背景会不会对你的PCR产物有干扰有问题的话只能努力洗洗柱子.
一般来说,RT-PCR的时候很多情况下会不知道模板DNA的序列,可以在Genbank中寻找和你要扩增的物种的亲缘关系较近的物种的同源基因,多找几种,用DNAMAN或其他软件可以比对它们的序列,这样可以
不能,LoadingBuffer里有溴酚蓝,可终止有关酶促反应,特别是限制酶切反应,只能在点样是加入LoadingBuffer,观察电泳的进度.
顾名思义.用bindingbuffer是为了增加洗脱柱对核酸的结合活性；washsolution是洗掉柱子里除核酸物质以外的杂质；而elutionbuffer就是最后把DNA从柱子上洗脱下来使用的溶液
不能,LoadingBuffer里有溴酚蓝,可终止有关酶促反应,特别是限制酶切反应,只能在点样是加入LoadingBuffer,观察电泳的进度.