细菌dna提取失败

盐析法只是用饱和氯化钠溶液代替有机溶剂沉淀蛋白质,获得DNA的过程.一般流程是采用常规手段裂解菌液后,按1/2体积比加入饱和氯化钠溶液,混匀,然后5000rpm离心,取上清即可.上清用2倍体积无水乙醇

提DNA那一步的话都没区别,就是破碎分离提取,区别在于纯化上,像寄生虫肯定是选择个体,然后取样提取,细菌病毒的话都是提取纯化然后再取样做DNA.

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GA是悬浮细胞的GB裂解使核酸和蛋白分离GD是去蛋白杂质的漂洗液TE是溶解DNA的PW是去盐的漂洗液

OD280代表蛋白含量高,说明细菌细胞壁裂解不充分,试试延长裂解时间吧

上百度上查查结核分枝杆菌的性质,一般是没有问题的,只要你细胞可以裂解开让DNA释放出来就可以进行下面的提取,建议你用磁珠法

大多数化脓性球菌都属于革兰氏阳性菌例如葡萄球菌、链球菌、肺炎双球菌、炭疽杆菌、白喉杆菌、破伤风杆菌等

博凌科为细菌基因组DNA提取试剂盒（离心柱型）独特的结合液/蛋白酶K迅速裂解细胞和灭活细胞内核酸酶,然后基因组DNA在高离序盐状态下选择性吸附于离心柱内硅基质膜,再通过一系列快速的漂洗－离心的步骤,抑

跟楼上那种类似菌落或者离心下来的菌体,加点无菌水,开水煮十分钟就可以拿来当模板了.楼上和我说的这种开水煮的方法不是每次都奏效,特别是一些革兰氏阳性菌,细胞壁太厚,高温无法破胞,或者菌体碎片对pcr影响

首先要知道,质粒是共价,闭合,环状的DNA（cccDNA）.以常用的碱裂解法为例：当菌体在NaOH和SDS溶液中裂解时,蛋白质与DNA发生变性,当加入中和液后,质粒的cccDNA分子能够迅速复性,呈溶

其实提取细菌基因组DNA并不是要用到上面提到的所有试剂.TE是用来浮起细菌的.如果是阳性菌的话最好是用溶菌酶处理一下.SDS可以让细胞裂解,并与核蛋白结合（当然也包括DNA）.蛋白酶K自然是降解蛋白的

我到目前为止,没有听到有什么影响!

建议你首选QIAGEN的,核酸提取试剂全球领先或者Promega（普洛麦格）公司的,他们公司的提取试剂盒也很不错,得率挺高的,操作也很方便TIANGEN也还可以,不过TIANGEN被QIAGEN收购了

先裂解菌体使DNA溶解,然后去除蛋白质,再通过无水乙醇或异丙醇的沉淀,离心即可得到,在此过程DNA会损失一部分

1．取细菌培养物1.5mL于5000rpm离心1分钟,倾去上清液.2．取沉淀加100μL预冷的溶液I摇匀并悬浮细胞,再加200μL预冷的溶液II摇匀后冰浴5分钟,最后加入150μL预冷的溶液III摇匀

提RNA一般注意：提取前材料的保存（新鲜材料,过夜处理的样品）,提取中对外源性的RNA酶的清除控制（离心管,PCR管,电泳槽,台面等的无RNA酶化处理）,提取后需要-80度保存.其次跑电泳时,注意电泳

在碱性环境中：染色体DNA氢键断裂,变性.质粒DNA：大部分氢键断裂,但超螺旋共价闭合环状的两条互补链不会完全分离.在中性环境中：质粒DNA复性,溶于溶液中,染色体DNA不能复性,形成缠连的网状结构,

简单一点的,直接沸水煮一下；CTAB裂解法,酚氯仿抽提等,很多种

放在超净台里做.超净台是无菌环境.其实我们做环境微生物的提取DNA都没有处理空气细菌的,空气中的细菌肯定是和水里的细菌有一部分是混合的,除非那个水原来不是和空气接触的.

一方面：提取的DNA是为了研究其序列,来做一些科学研究,另一方面：这类细菌体内能够产生某种特殊的物质,通过提取其DNA导出目的基因,导入受体细胞中并使之表达,生产出人类需要的产物.