简并引物是引物序列某位置上的核苷酸可以分别是两个或两个以上不同的碱基,引物实际上

一般未知的序列旁边都有已知的一段吧,就是你说的“修饰片段”?PCR这种flankingsequence可以有很多方法,比如TAIL-PCR,用ADprimer（简并引物）和特异性引物就可以得到目标片段

正向引物：5'CTTCGAAATTC反向引物：5'CCGATCGGGAGA(TCTCCCGATCGG的反向互补序列）当然,这对引物有些短,其实真正设计时上下游引物的序列中都可包含部分基因1的序列,以平

什么跟什么说的太不清楚饿了只要你需要的那段序列是对的不就行了嘛跟引物序列有啥关系毕竟大部分的PCR引物设计都是在需要的序列两端隔一段距离而且如果你测序是拿PCR引物测的话那前面的几十个碱基都是测不准的

mRNA序列从NCBI上搜如果是常规PCR引物用pp5设计realtime引物搜别人文献里面报道的实在没有再自己设计

你去找各大公司的产品手册,上面会有非常详细的随机引物的序列,随机引物非常的多,有上百种

http://www.ncbi.nlm.nih.gov/nuccore/194473617?report=genbank

引物设计原则：1、长度：15—30bp,其有效长度[Ln=2(G十C)十(A十T)]一般不大于38,否则PCR的最适延伸温度会超过Taq酶的最佳作用温度(74度),从而降低产物的特异性.2、G十c含量

前提：你的这条序列是5‘--3’的吧正向引物5‘--3’：TGCAACTACGTCCAC反向引物5‘--3’：TCGGACAAGACGTGC再问：能说说为什么吗？再答：DNA是双链的，引物结合于一条链

可以找一下原始文献,或到ncbi里搜索一下.另外ncbi里有个premer-blast可以试一下.---中国西部生命科学论坛再问：primerblast主要进行序列比对，NCBI没有查询到。

试试primer软件.

基因bank里面有~

一直用primer,还有实验室老板自己写的一个软件,感觉诧异都不大,因为基本的要满足的要素都是一样的,最后也都能拿到蛋白,CODEHOP没用过,感觉万变不离其宗.

是编码链.用错链对引物设计有影响,因为核苷酸结构不对称,分三端和五端.所以5'-ATCGXXXXXXXXXXXXXX和3‘-ATCGXXXXXXXXXXXXXX是两个不同的引物分子.引物设计软件都使用

对于这种情况,如果你只是找不到扩增引物的序列,但是能找到后面所要扩增的序列的话,那么可能还是因为测序引物离你的扩增片断太近.如果不是这种情况,那么可能是你根本没有将扩增片断成功连入当然还有一种可能是公

正规生物公司合成引物不是应该提供序列的吗,而且一般都是自己设计引物序列交给生物公司帮你合成啊,怎么会没序列呢,要是你知道货号可以直接联系合成的公司询问呀

我有一个关于primer5的使用技巧的文档,你需要的话可以给你,里面介绍很详细,其实引物设计都是很简单的,自己多试试就很简单了

引物有一条和模版的序列相同,而另一条和模版的序列反向互补,上游和下游是自己定的,分别位于模版的两端

这个问题很简单,扩增序列应该称为目的基因,目的基因一般都上万bp,从两头开始当然不合适.PCR扩增只能扩增出上下游引物之间的序列,因为只有引物之间的DNA双链是解链状态的.你的问题说明你对基础知识掌握

没错,DNA的两条连是互补的,但是引物绝对不可以互补.引物是放在DNA两条连的各一端引导游离DNA上DNA链,不仅不可以互补,还要尽可能的不同.

真想由衷的说一句懒死你,网上到处是,就不自己查.Forward(17mer):5′-(GTTTTCCCAGTCACGAC)-3′（2956-2972）Reverse(17mer):5′-(CAGGAA