石蜡组织考马斯蓝染色-搜答案-智慧作业帮

[1]请教丁老师如何制作皮肤的石蜡切片一皮肤组织标本制作及常用染色方法概述皮肤组织标本常规以福尔马林固定,石蜡包埋,苏木素－伊红(HematoxylineosinHE)染色.皮肤组织的制片及染色技术与

可能原因：蛋白上样量太少,蛋白转过去了,蛋白还没转到膜上去,丽春红灵敏度不够.你的蛋白是单一蛋白还是总蛋白?如果是总蛋白,而且上在同一道上,那就没必要做后面的了.很可能是转膜失败.

考马斯亮蓝G250具有红色和蓝色两种色调.在酸性溶液中,其以游离态存在呈棕红色；当它与蛋白质通过疏水作用结合后变为蓝色.它染色灵敏度高,反应速度快,约在2分钟左右时间达到平衡,在室温一小时内稳定.在0

应为不知道你的标准曲线Y的单位,如果是以加入的标准品的质量做出的曲线,同时没有什么稀释过程的话,你就直接算好了：Y=0.0044*68.790+0.0245=0.327176（单位）,总蛋白量=0.3

工作量大了点吧!自己看看参考资料吧!很全

是电泳结束后,把分离胶切下来放在平皿里,用考马斯亮蓝染液（0.05%）染色过夜,之后换脱色液（醋酸：乙醇：水1：4：5）泡一段时间就能看到清晰的条带了~

当然是石蜡切片好,石蜡切片比冰冻切片薄,结构更清晰,而且不容易掉片,标本可长期保存.

染太久后背景太重,不容易脱色,也就不容易看到条带

会的.不仅碱性氨基酸,去垢剂,如SDS,还有高浓度的缓冲液都会有影响.而且由于蛋白质酸性,碱性氨基酸含量不同,即使蛋白质浓度相同,所测出的值也会不同.

将100mg考马斯亮蓝G-250溶于50m195％乙醇,加入100ml浓磷酸,然后,用蒸馏水补充至200ml,此染液放4℃至少6个月保持稳定.—————————————————————————————

有问题的地方基本排除了我只能想出一个问题就是要加强操作别的我也不知道了

降低染色液浓度,缩短染色时间.考染太过,会使得所有蛋白质表面都包着厚厚的一层染料,无法定量.只有降低染色液浓度,缩短染色时间才能使得染色回到线性区域,让染料强度和蛋白质浓度成正比.

1.分光光度计预热下会准些2.是否调0\100,3.用紫外的试试看楼主可曾换一台分光光度计试试,有些仪器时间长了不准的

石蜡为有机烷烃,利用相似相容原理,可以选择一些有机染料,比如蒽醌,偶氮类化合物等.这些很多,可以试一试.:再问：具体的，谢谢再答：使用油溶性颜料应该可以办到，如：油溶黄油溶红等你可以考虑这些油溶性的燃

你这个有可能是1脱色不全建议再脱色一会2如果跑的是总蛋白的话,有可能会出现连续的蓝色条带.3蓝白相间的竖条纹?我猜这是横条纹吧……再问：是竖条纹，不是横着的条带。还有有时样品前沿跑不到一条线上，怎么回

WB的胶用考马斯亮蓝染色,有为了确定你的目的条带电泳情况目的,还有一个目的,就是跟用丽春红染摸一样的作用,看转膜的效率.也就是看你的目的条带是否都转移到你的膜上了.这步染色完全可以省略,一般都可以用预

染色的目的是使细胞组织内的不同结构呈现不同的颜色以便于观察.未经染色的细胞组织其折光率相似,不易辨认.经染色可显示细胞内不同的细胞器及内含物以及不同类型的细胞组织.染色剂种类繁多,应根据观察要求及研究

是液体就好测了呀把样品取出1ml,按照做标准曲线时一样的处理,再测OD值就行了

上样太多了,每孔里面没必要上那么多样品,你上样之前应该定下蛋白或是用Nanodrop测下蛋白浓度

不用固定,染色液中乙酸就有固定的作用,染色液配方：甲醇：水：乙酸=4.5:4.5:1或5:4:1再问：请问，AC固定是起什么作用的？谢谢。。。再问：请问，AC固定是起什么作用的？谢谢。。。