用Pfu酶做pcr跟用Extaq酶做pcr有什么区别?

用灰度分析软件统计,譬如Bio-rad的蛋白凝胶分析软件Quantity_One_v462

1按照教科书上的要求,PCR的退火温度应该为TM-5度,不过有时稍高点也可以,不过你得温度明显过高!试试降低温度.引物的TM值太低了,最好重新设计引物,将TM值稍微高点,不然在以genome这样的复杂

1、一百多BP也可以,不超过两百即可,150bp以内最好.2、坐标线?是标准曲线吧?你的方法是可以的.3、刚好100bp确实存在这个问题,一百几十BP就可以分开了.4、探针法在原理上更为严格,所得数据

当然可以,前提是你引物设计的好!没有非特异性扩增,怎么会没有意义呢?放心做吧!

反而不能用双蒸水保存DNA,DNA在双蒸水中因为没有足够的离子而容易变性.只有像引物这样小片段、单链的DNA片段可以用水保存

你说的TL988是国产的天隆PCR仪器吧?那个仪器很烂的,千万不要买,建议买ABI7500,或者安捷伦的MXP3005,或者伯乐的,eppendorf的,都可以,基本上都是96孔4～5通道的.现在36

问题很多啊.或者是你的PCR仪需要进行荧光校准（如果其他探针也没有信号的话）,已经不能收集荧光信号了.或者是你的探针本身就有问题,合成的不好,信号很弱甚至没有信号.或者是你的探针存放时间太长,存放条件

差不多吧,只要把DNA提取出来,照样做PCR

简单呐,主要是设计引物,分为外套引物和内套引物你可以设计单边巢式或者双边巢式的引物,如果内套引物为1和2的话,外套可以设计3和4,或者设计3和1配,或者设计3和2配.打个比方,比如你要扩增的目的基因在

酶可能会有影响,有可能活性降低,其他dNTP、buffer等影响不大再问：就只有Taq酶吗？引物也没啥影响吗再答：放在冰盒内没什么影响，只要不是在常温下放着

两者都是DNA聚合酶,区别在于,pfu是高保真DNA聚合酶,即DNA合成时碱基错配率比taq酶低,一般情况,不太长的片段或序列准确度要求不是很严格的用taq酶,对于长片段或序列准确度要求高的用pfu酶

PCR技术是聚合酶链反应(PolymeraseChainReaction,PCR),是80年代中期发展起来的体外核酸扩增技术.它具有特异、敏感、产率高、快速、简便、重复性好、易自动化等突出优点；能在一

博凌科为-为你如果用普通PCR就可以,那不妨参考魏群编的《分子生物学实验指导》,你问的问题上面有比较详细的解答

看你的2XPFU是什么形式,如果是mix的形式,一般已经有染料在里面了,可以看到mix的溶液就是蓝色,这样的话,样品可以直接上样的.但是如果你加的溶液都是透明的,完成后还是需要加loadingbuff

博凌科为的2×PfuPCRMasterMix实验效果挺好的■显著提高PCR反应的特异性和灵敏度,还能有效扩增GC含量高、二级结构等复杂模板.最低可扩增2个拷贝的目的模板,使实验结果更加精确.■独创的T

博凌科为的2×PfuPCRMasterMix包含PfuDNA聚合酶、dNTPs、MgCl2、反应缓冲液,浓度为2×.具有快速简便、灵敏度高、特异性强、稳定性好等优点,可最大限度的减少人为误差.适用与高

博凌科为的2×PfuPCRMasterMix（不含染料）还是很不错的!博凌科为的产品,我见不少实验室都在用他们的试剂,还有很多大学的医学部都在用如果是不好的话,他们肯定做不进去吧!所以答案是肯定的了!

你的引物怎么这么长?预变性94℃5min,变性45s,退火温度看你引物是怎么设计的了.你这么长的引物估计退火温度肯定是60℃以上了.退火45s即可.72℃延伸1.5min到2min.（pfu聚合速度大

pfudnapolymerase是目前已知dna合成准确性最高的酶.在正常的pcr扩增程序下,其扩增产物的错误率为4000bp中发生一个.错误率仅为taqdnapolymerase的1∕7--1∕10

一般用40bp的GC夹：5‘-CgCCCgCCgCgCCCCgCgCCCggCCCgCCgCCCCCgCCCC-3',合成引物的时候,把这个序列加到一条引物的5'端就可以了