gDNA电泳条带拖尾的原因
来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/05/17 11:39:21
MARKER有好多种,你看看你用的是哪种,每种都会有个说明书告诉你你的MARKER的每条带指示是多大,然后看你的电泳图中亮条带对应的是MARKER的哪个位置
蓝色条带分别是溴酚蓝和二甲苯青FF(请注意不是二甲苯氰).溴酚蓝在琼脂糖中的泳动速率约与长300bp的双链线状DNA相同,而二甲苯青FF的泳动则与长4kb的双链线状DNA相同.希望能够对你有所帮助.
两者原因,可能是PCR体系没设计好,或者是胶没制好,跑电泳时注意保持电流恒定再问:多谢指教!跑电泳时我用的是恒功率,这个影响会很大吗?最近在做SSR标记有点迷茫!
分离胶的浓度的问题.
中间的是RNA
可以照胶的时候去调节亮度,对比和γ射线,然后会清楚一些.同时,你优化下PCR扩增条件之类的,提高扩增效率.希望对你有帮助.望采纳.再问:感谢回答,我会试试调节亮度。请问,这跟电泳时使用的染色液有关系吗
一个可能原因,DNA结合了蛋白质,所以跑不出去.加loadingbuffer后加热(90度以上)一下再上样试试.另外一个原因,你的产物特别大(不一定是目标产物)再问:我做的是菌落PCR电泳检测结果,我
因为这两种RNA的相对含量啊亲.那两条带一条在3.8kb,一条在2kb,都是rRNA的一部分,本来的相对含量大概就是1:2.另外,要达到这两条带1:2的比值比较难,只要最下面弥散的带不多质量就还可以,
主带显著的情况下,很可能是引物聚合体.如果没有出现显著的你想要的主带,则是非特异扩增产物.第一种情况没事不用理会,第二种情况需要筛查模版中与引物的非特异性互补区,重新设计引物,或者升高退火温度试试.
用迁移率算迁移率=蛋白质分子的移动距离:前沿分子的移动距离迁移率(m),蛋白质分子量(M)lg(M)=-bm+k其中b和k为常数也就是说迁移率(m)与蛋白质分子量(M)的对数成反比实验中用已知蛋白质分
首先要看你的条带是否清晰,虽然亮度不够但是清晰度应该高,没有拖尾没有非特异条带和引物二聚体,如果以上都没有,仅仅是目标条带不够亮的话,我觉得你可以将25微升体积同比放大至50微升反应体系,相应的制胶的
出现非特异性扩增带PCR扩增后出现的条带与预计的大小不一致,或大或小,或者同时出现特异性扩增带与非特异性扩增带.非特异性条带的出现,其原因:一是引物与靶序列不完全互补、或引物聚合形成二聚体.二是Mg2
我觉得主要是胶和电泳缓冲液的问题,Tris8.86.8浓度,pH是否正确.SDS的纯度可能也有关系.丙烯酰胺的浓度,交联度合适不合适.做胶的时候各种溶液是否加的正确,胶的浓度是否合适,电泳缓冲液的浓度
marker能看到吗?marker很清楚,电泳就没问题.说明没有DNA.可能提取失败,沉淀也许是盐.测测浓度吧,应该很低.看看提取程序是不是有问题.
RNA在提取过程中和保存期间非常容易被RNA酶降解,提取过程得非常小心,保存期间也得加RNA酶抑制剂,不知道紫外分光光度计检测时含量和纯度如何,及时被降解,也应该有拖尾才对,可能是浓度太低,建议加大上
你提出了两种构型的质粒所以有两条带,另外你的质粒PUCmT应该含有两个Ecor1酶切位点所以虽然有不同构型的智力被切割但产生的片段还是两条,并且大小形同,因为此时片段已经呈现线性.
开始我以为是退火温度问题,但是你说做了两次,第一次没有条带,第二次有一条没有,这说明你加样有问题,还有你为什么要同一个cDNA要做六个PCR呢?还是lz说的不清楚?同样的条件同样的样品没理由会六条中只
如果引物序列,PCR体系,程序,以及所用的物种都和文献一样的话,可考虑两种情况:1.你所参考的文献真实度有待考量.2.你所提取的该物种DNA质量不好.需重新提纯.
1退火温度不合适2引物不合适3模板有问题4酶由问题
电泳出现拖尾现象,英文成为smear,就是弥散.其原因,主要从以下两个方面考虑:1、PCR产物自身原因:往往由于酶量过多或酶的质量差,dNTP浓度过高,Mg2+浓度过高,退火温度过低,循环次数过多,而