作业帮流式细胞仪原理检测转染细胞是否稳定
来源：学生作业帮助网 编辑：作业帮 时间：2024/05/11 01:50:17
不知道你没杂出条带是因为什么原因,还有你杂交的抗体是目的蛋白的抗体吗?你杂杂标签蛋白试试,看看有没有条带啊?我这么说是因为,膜蛋白确实不好提取,而且提取后可能空间构想改变了,你的抗体可能识别不了了,而
GFP和PI的激发光有很大的重叠.做compensation的时候会很困难.你必须提供GFP,Annexin5和PI单个阳性的细胞.
PI肯定不行了你是要做凋亡么那就没办法了吧Annexin倒是可以用如果是想染核的话还可以用DAPI蓝色加抗生素对细胞状态肯定有影响的不过你只要保证要么一直加抗生素要么一直不加不会对结果有大的影响
已经做完流式,看到结果却不知该怎样分析了.我用的是AnnexinV-FITC凋亡试剂盒,AnnexinV/PI双染检测细胞凋亡.请教各位,凋亡散点图中第1,2,4象限到底分别代表什么细胞?手里的资料说
一、原理在正常细胞中,磷脂酰丝氨酸（PS）只分布在细胞膜脂质双层的内侧,而在细胞凋亡早期,细胞膜中的磷脂酰丝氨酸（PS）由脂膜内侧翻向外侧.AnnexinV是一种分子量为35~36kD的Ca2+依赖性
转染成功一般都会表达GFP蛋白,这个蛋白在流式上面可以用FL1通道检测到.转染成功的有表达,不成功的没表达,很容易算出细胞转染率.
1.是100个细胞中表达CD33的细胞占80%2.CD33是粒细胞表面标志；CD19是B细胞表面标志.没有阳性阴性一说.主要是看是否是克隆增殖（癌变）3.见异常细胞是诊断标准,CD33达80%,提示是
应该还有优化的潜力的,我不知道你用的什么转染试剂.转染效率本身和你用的转染试剂有很大的关系,建议你先找来集中不同的转染试剂,用VenusC1或者是VenusN1作报告质粒,找到最适合你的细胞的试剂,然
这个问题其实不难,但是你如果样本多的话,那还是建议找外包公司做吧,重庆威斯腾生物负责整体实验外包,做了10多年了,口碑很不错.
一般流式细胞仪都有FITC通道,GFP可以用该通道来测量.用同一细胞系的转染了无GFP质粒的细胞做阴性对照,设置阈值.
很简单的啊.流式细胞仪数据分析5.1数据采集及显示光信号转换成电压脉冲后,再通过模数转换器转换成为计算机能够储存处理的数字信号.流式细胞仪的数据以FSC标准格式存储,该标准由“分析细胞学协会”制定.根
流式细胞仪不是ECT,他只能识别不同的荧光,一般有四个荧光通道FL1-FITC,FL2-PE,FL3和FL4的激光不同厂家可能不同（主要是BD和BECMAN）,所以只要是悬浮的颗粒,只要可以标记上荧光
跟质粒一样啊用lipo什么的脂质体转就行了一般转染试剂的说明书上都会说的
我简单说一下：1.首先,机器吸取细胞混悬液,射入由鞘液（一般都是磷酸盐缓冲液）.由于鞘液的流速大,所以细胞混悬液通过轴流的形式在中央,一般是单个细胞排队的形式.2.然后细胞通过检测窗口.有激光束照射.
用PI单染就可以,PI是用来测细胞周期的,在单倍体峰前如果有个亚峰则表明有凋亡,但是这个方法不是很好,坏死细胞也会包含在内.准确地说用PI单染测出的凋亡率应该是死亡细胞占细胞总数的比例.建议用Anex
你可以看看这个网站,网站论坛里有详细的资料可供参考.其中有流式细胞术版块,专门讨论这一方面的问题,
显微注射法.基因枪法.
要,里面有不少凋亡细胞,将上清吸在离心管理,贴壁的细胞胰酶消化后混一起离心就可以了
转染的质粒带有标记基因,比如EGFP.分析绿色细胞的比例就得到了转染效率了.
转染的质粒带有标记基因,比如EGFP.分析绿色细胞的比例就得到了转染效率了.