流式细胞仪 GFP

来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/05/11 02:39:07
PF用带目标基因的质粒(pEGFP-N1)转染HepG2细胞,用G418筛选稳定表达株10天,GFP表达减弱减少.

只要没有整合到基因组DNA,转染进入的外源性DNA都会随着细胞分裂而被稀释.所以经过10天后表达肯定是会减弱的,这是正常现象.只有当外援DNA整合到基因组后,表达水平才能稳定

GEP转染细胞能不能用Annexin5和PI双染检测凋亡,GFP的荧光会不会影响流式检测的结果

GFP和PI的激发光有很大的重叠.做compensation的时候会很困难.你必须提供GFP,Annexin5和PI单个阳性的细胞.

想请教您关于流式的问题,用一个双荧光载体转染细胞,其中用RFP验证转化效率,GFP验证工作效率

首先,你这个实验室双色的,就要做compensation.技师应该和你说明的啊.如果你自己做的话,我简单和你说一下:RFP和GFP的激发光谱有部分是重叠的,所以必须在检测的时候去掉重叠的部分(comp

【求助】流式细胞仪检测细胞凋亡结果该怎样分析

已经做完流式,看到结果却不知该怎样分析了.我用的是AnnexinV-FITC凋亡试剂盒,AnnexinV/PI双染检测细胞凋亡.请教各位,凋亡散点图中第1,2,4象限到底分别代表什么细胞?手里的资料说

请问流式细胞仪检测细胞凋亡的原理是什么?

一、原理在正常细胞中,磷脂酰丝氨酸(PS)只分布在细胞膜脂质双层的内侧,而在细胞凋亡早期,细胞膜中的磷脂酰丝氨酸(PS)由脂膜内侧翻向外侧.AnnexinV是一种分子量为35~36kD的Ca2+依赖性

流式细胞仪检测结果问题

1.是100个细胞中表达CD33的细胞占80%2.CD33是粒细胞表面标志;CD19是B细胞表面标志.没有阳性阴性一说.主要是看是否是克隆增殖(癌变)3.见异常细胞是诊断标准,CD33达80%,提示是

关于流式细胞仪的问题,

这个是相对量,处于G1期的细胞设为1,G2期的就为2.S期的位于1-2之间,如果是凋亡细胞就小于1.单倍体的生殖细胞是0.5

流式细胞仪如何测免疫球蛋白

流式细胞仪不能检测游离的Ig,但是如果细胞表面结合有IgG或者IgM等免疫球蛋白,则这些免疫球蛋白可以被抗免疫球蛋白的抗体识别.如果这些二抗被荧光染料标记,就可以用流式细胞仪来检测细胞表面是否有免疫球

如何用流式细胞仪检测GFP的表达

一般流式细胞仪都有FITC通道,GFP可以用该通道来测量.用同一细胞系的转染了无GFP质粒的细胞做阴性对照,设置阈值.

流式细胞仪检测的原理

很简单的啊.流式细胞仪数据分析5.1数据采集及显示光信号转换成电压脉冲后,再通过模数转换器转换成为计算机能够储存处理的数字信号.流式细胞仪的数据以FSC标准格式存储,该标准由“分析细胞学协会”制定.根

绿色荧光蛋白基因(GFP)被发现以来,一直作为一个监测完整细胞和组织内基因表达及蛋白质位置的理想标记.请根据图表回答下列

(1)由于图中GFP的M端伸出的核苷酸的碱基序列是-TCGA-,因而M端是限制酶HindⅢ剪切形成的黏性末端,N端伸出的核苷酸的碱基序列是-TGCA-,因而N端是限制酶PstⅠ剪切形成的黏性末端.(2

流式细胞仪的原理是什么?

我简单说一下:1.首先,机器吸取细胞混悬液,射入由鞘液(一般都是磷酸盐缓冲液).由于鞘液的流速大,所以细胞混悬液通过轴流的形式在中央,一般是单个细胞排队的形式.2.然后细胞通过检测窗口.有激光束照射.

流式细胞仪检测细胞凋亡,单染可以检测出细胞凋亡率吗?

用PI单染就可以,PI是用来测细胞周期的,在单倍体峰前如果有个亚峰则表明有凋亡,但是这个方法不是很好,坏死细胞也会包含在内.准确地说用PI单染测出的凋亡率应该是死亡细胞占细胞总数的比例.建议用Anex

转基因小鼠gfp细胞为什么不发荧光

1,载体是否有问题?gfp连接方向?启动子是否匹配?2,没转进去?或者转进去之后没表达?3,荧光显微镜设置是否妥当?

绿色荧光蛋白基因(GFP)被发现以来,一直作为一个监测完整细胞和组织内基因表达及蛋白定位的理想标记.根据右面的图表回答下

(1)从图示可知,GFP的M端伸出的核苷酸的碱基序列是TTCGA,是限制酶HindⅢ酶的切割位点;N端伸出的核苷酸的碱基序列是CTGCA,是限制酶PstⅠ切割位点;则在构建含该GFP的重组质粒A时,应

什么是gfp

GFP,即绿色荧光蛋白(GreenFluorescentProtein)2001年1月11日,美国科学家宣布培育成世界上首只转基因猴,这是世界上首次培育成功转基因灵长类动物.添加在这只名为"安迪"的猴

第一次做转染试验,请问怎样计算转染率,载体是带GFP的,就是弄不明白是用荧光的个数比上接种细胞总数吗

转染率是大概估计一下,有荧光的占总细胞的比率,如果要精确值可以去做流式.再问:请问具体做流式要怎样做,能说具体一点吗?转染率很低做流式会不会没效果?比如不到1%,那流式可以测出来吗?再答:你的转染目的

流式细胞仪中的"流式细胞"是一个名词吗?它是什么意思?谢谢!

不是流式细胞仪就是进行流式细胞分析的仪器,它集电子技术、计算机技术、激光技术、流体理论于一体,是一种非常先进的检测仪器,被誉为试验室的“CT”.流式细胞术(FlowCytoMeter,FCM)是一种在

流式细胞仪怎么调试啊?

什么型号,哪一步需要调试?是每日维护,具体什么实验?多少种颜色?