植物遗传转化载体大肠杆菌质粒

最大的问题应该是：大肠杆菌是原核生物,动物基因是真核基因,直接用限制酶切获得的基因在大肠杆菌内表达会错误,应该选择动物的相应基因的mRNA反转录得到DNA,或者根据相应蛋白质的氨基酸排列顺序推测DNA

不是.pCAMBIA-2301载体是用于植物表达的载体,只能在农杆菌里复制,不能在大肠杆菌里复制.

一般程序如下：获得目的基因－准备表达载体－将目的基因插入表达载体中（测序验证）－转化表达宿主菌－诱导靶蛋白的表达－表达蛋白的分析－扩增、纯化、进一步检测.[主要试剂主要试剂]主要试剂1、LB培养基.2

利用PCR扩增基因,经测序正确后,酶切连接到质粒,转化大肠杆菌筛选阳性克隆,鉴定正确后诱导表达,通常是用IPTG诱导

用大肠杆菌表达载体就行啊!问题就是,ORF要正确,表达的蛋白可能被降解,激素基因要把内含子去掉,启动子、终止子都要用大肠杆菌的等等.

空载体是没有插入外源基因的载体空质粒是没有插入外源基因的质粒,可以说是空载体,但空载体不一定是空质粒

不管酶切还是PCR,都是间接的结果.要确定克隆的正确,一定要测序的啊.你测个序,问题就迎刃而解了.到底是什么问题也就清楚了.再问：我前些天去遇到一样的问题，酶切鉴定正确，但测序后什么也不是呢再答：所以

双元表达载体系统其实是一个质粒,它包含两个部分,一个部分是能够被转移的T-DNA,另一个是能够帮助T-DNA转移的Vir区.T-DNA转移区是有左右边界的,在转基因时会在左右边界处断裂,只将左右边界以

因为这时候抗抗生素的基因还没有表达出产物,加入抗生素会把细胞杀死.不过青霉素是个例外,因为青霉素只是阻止细菌细胞壁的合成,而不是直接杀死细胞,所以它只是抑制增殖,细胞还可以存活,然后表达抗青霉素基因,

大肠杆菌里有质粒,换句话说,质粒是从大肠杆菌里提取出来的.而用噬菌体是因为它侵染大肠杆菌是一个很有依据的实验验证过的.课本不会弄那么高深.

就是利用基因工程首先提取目的基因从细胞的信使RNA中提取出P53基因构建基因表达载体将目的基因P53和载体-大肠杆菌质粒重组将目的基因导入受体细胞可以选择大肠杆菌或动植物细胞作为受体细胞,导入重组DN

首先看你是否使用蓝白斑筛选,如果使用了白色菌落就行了,但是x-gal比较贵,所以很多实验室都不用,而用菌落PCR.首先配制clonebuffer,每400微升含EXtaqbuffer40微升,Mgcl

答：能遗传给下一代.解析：质粒位于大肠杆菌胞质中,它会随胞质的分离传递给下一代.再问：那大肠杆菌是怎么遗传的呢再答：答：主要是二分裂，细胞质中的物质也根据功能的需要而进分配。

用钙离子处理大肠杆菌,使细胞处于一种容易吸收周围环境中DNA的生理状态（使细胞膜的通透性增加）,这种大肠杆菌成为感受态细胞.

一般在细胞内能稳定存在,为松弛控制型质粒.有标记基因,能根据标记基因的特性来判断该质粒是否转录到宿主细胞中.在目的基因之前加入了强启动子.

穿梭质粒是指可以在多种宿主下复制.比如说通常能够在哺乳动物,酵母或者其他细菌复制表达的质粒,同时可以在大肠杆菌内复制.这样利于对质粒的分子生物学操作和大量制备.表达质粒就是指带有启动子,增强子等等,使

如何遗传?重组质粒,即基因载体.是一个复制子,在细胞内可以自主复制,细胞分裂时,质粒随机分配进入子细胞,类似细胞质的母性遗传（如线粒体、叶绿体等）.如何检测?质粒的检测因质粒性质不同而不同,一般人工质

动物病毒.原因：它的遗传物质可以在动物细胞内正常表达.再问：λ噬菌体衍生物为什么不能用？再答：质粒：一般用于克隆载体，且是在原核细胞中。植物病毒：转染植物，不能转染动物细胞。λ噬菌体衍生物：由天然λ噬

大肠杆菌的我记得名字好像有个叫ecoli希腊的名字再提很多但大肠杆菌最常用啦

影响转化效率的因素很多,主要有：感受态细胞制备的质量、受体菌生长期（大肠杆菌在对数生长期易产生感受态）、质粒的大小和构型、所用试剂的纯度、接种前菌种的保藏方式、冰浴时间（延长冰浴时间可略微提高转化率）