CTAB提DNA絮状沉淀
来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/05/17 23:28:54
多放一点液氮,磨得时间适当长一些.如果你的样品比较多,在液氮还没有蒸发前迅速把粉末转移到EP官管中,然后把它暂时放到-20的冰箱中,等所有的样品全部磨好后统一加CTAB.你做实验的时候材料最好尽量新鲜
真是牛人啊~没加沉淀剂吧?
蓝色絮状沉淀.物品颜色:蓝色物品外观:絮状,不溶于水.絮状,有点像松散棉花那样子典型物品:Cu(OH)2
CTAB法原理CTAB(hexadecyltrimethylammoniumbromide,十六烷基三甲基溴化铵),是一种阳离子去污剂,具有从低离子强度溶液中沉淀核酸与酸性多聚糖的特性.在高离子强度的
(1)取材料,加液氮研磨成粉末状,迅速移入1.5mlEppendorf管中;(2)加入800μl的CTAB提取缓冲液,混匀(CTAB在65℃水浴预热),每5min轻轻震荡几次,20min后12000r
前面的步骤没有操作好,要么是你的样品比较特殊,含有较多的色素或脂肪,先用电泳检测一下,如果条带清楚就可以用,如果混乱要修改实验设计.不知道你提的是动物还是植物的DNA,估计可能是植物色素或者是叶片的蜡
液氮只是为了便于破碎植物组织,没有也一样能提取DNA,毕竟加CTAB后还要65度水浴,分解得厉害的话就减少振荡,或增大CTAB用量,使DNA尽可能多地浸取出来.再问:那研磨的时候为了是它充分的研磨是要
你在沉时加入1/2V的5MNacl和2V的无水乙醇,主要是高浓度盐离子可以使多糖悬浮在溶液中,无水乙醇可以减少杂质离子的沉淀,试试吧,我一直这么做,效果还可以吧再问:哦,非常感谢!我一直都是用1/10
一般氯仿异戊醇都是室温就可以了,你提取的什么组织呢?再问:我取的是丁香叶片有点老现在提取不出来怎么办?提取出来的都是跟果冻似的东西,有极少有白色絮状沉淀,但是跑电泳根本没有东西,有絮状的电泳显示是RN
(1)可以的,液氮冷冻更容易破碎细胞壁释放DNA,但是不冷冻也没关系的,提取的DNA量即使少点也足够满足试验要求.(2)-20度足够保存,用一年以上都没问题,超低温保存时间当然更长,但是切忌反复冻融,
水相与氯仿之间有类似白色的膜,那说明上次抽提的还不是很干净,里面有蛋白之类的杂质.1、你可以再抽提一次,杂质肯定会减少;2、吸样的时候小心点,不要全吸了,动作轻柔点,不要猛吸,否则杂质也会没吸的.如果
Tris饱和酚分上相(tris)和下相即有机相酚,这样保存可以避免酚的挥发以及防止酚类氧化成醌,抽提时取下层酚相.在吸取的时候要将枪头插到水相以下的酚相.若吸到的是上层tris溶液,它会与我们的上清互
没事,饮吧.有这玩儿是说明是生晒的
下游做PCR的话,应该保证模板的纯度,CTAB法提取多半会得到浓度不错但纯度不够的DNA,建议将得到的DNA进行纯化,或者直接使用试剂盒提取,现在的国产试剂盒都还不错的,节约时间又不贵
中学要求胶状沉淀,2个---------硅酸沉淀、Al(OH)3白色胶状沉淀絮状沉淀,2个---------Cu(OH)2蓝色絮状沉淀,Fe(OH)2白色絮状沉淀而Fe(OH)3,由于与Al(OH)3
1)取材料,加液氮研磨成粉末状,迅速移入1.5mlEppendorf管中;(2)加入800μl的CTAB提取缓冲液,混匀(CTAB在65℃水浴预热),每5min轻轻震荡几次,20min后12000r/
marker能看到吗?marker很清楚,电泳就没问题.说明没有DNA.可能提取失败,沉淀也许是盐.测测浓度吧,应该很低.看看提取程序是不是有问题.
DNA浓度很低吧,沉淀多不一定DNA纯度就高,有可能蛋白质也很多,提DNA的过程中蛋白质有过多残留.跑电泳不知道你的buffer那条线有没有,如果也没有的话也许就是电泳的操作过程中出现问题了.
我用过CTAB法提取植物叶片DNA,会得到叶片中所有的DNA,总DNA里当然包括叶绿体和线粒体DNA,使用这种模板可以进行叶绿体和线粒体基因组上的扩增,我以前做过TRNL_F这个基因的扩增,用的就是C
CTAB法提取完DNA后,离心管开盖常温放置(也可以放超净工作台中吹,也可以真空干燥)10-15分钟左右,尽量挥发掉残留的乙醇.但不能放置太久,不然DNA干燥了就很难溶解了.通常情况下,即使没有放置太