提取总mRNA凝胶电泳应出现几条带

注意事项（1）由于与凝胶聚合有关的硅橡胶称、玻璃板表面不光滑洁净,在电泳时会造成凝胶板与玻璃板或硅橡胶条剥离,产生气泡或滑胶；剥胶时凝胶板易断裂,为防止引现象,所用器材均应严格地清洗.硅橡胶条的凹槽、

这个要看条带的位置了,如果是在加样孔附近的话就是蛋白质污染了,你最好把电泳图片附上来,我再给你看看

1.防止样本降解.液氮速冻或者RNALater保存液保存2.防止RNA酶污染,可以加抑制剂3.迅速操作4.提取后尽快进行下一步实验,mRNA不宜存放于水溶液冻存.

中国农业大学的,我们都是用广州健仑生物科技有限公司的的产品,

两者原因,可能是PCR体系没设计好,或者是胶没制好,跑电泳时注意保持电流恒定再问：多谢指教！跑电泳时我用的是恒功率，这个影响会很大吗？最近在做SSR标记有点迷茫！

除去mRNA是因为：细胞中原有的mRNA会作为合成蛋白质的模板干扰实验结果.除去DNA是因为：细胞中原有的DNA可能作为mRNA合成的模板,而新合成的mRNA也会干扰实验结果.因此,需要除去细胞提取液

一、利用mRNA3‘末端含有多聚(A)+的特点,当分离的总RNA流经oligo(dT)纤维素柱时,在高盐缓冲液作用下,mRNA被特异的吸附在oligo(dT)纤维素上,然后逐渐降低盐浓度洗脱,在低盐溶

纠正：高度分化的细胞可以提取出mRNA,只是种类有所差别因为高度分化的细胞中的基因是选择性表达的这之中不表达的基因就不会发生转录所以自然不会产生该种基因的转录mRNA

提取过程中操作不当造成基因断裂,或有其他干扰性DNA成分,操作时的污染造成

Trizol法1、将组织在液氮中磨成粉末后,再以50-100mg组织加入1ml的Trizol液研磨；每2E6个细胞加入1mLTrizol.注意样品总体积不能超过所用Trizol体积的10%.2、研磨液

我的教训是加酒精时要慢一点,过滤时要多过滤几次,不然会剩余大量蛋白质,影响结果.

你这个有可能是1脱色不全建议再脱色一会2如果跑的是总蛋白的话,有可能会出现连续的蓝色条带.3蓝白相间的竖条纹?我猜这是横条纹吧……再问：是竖条纹，不是横着的条带。还有有时样品前沿跑不到一条线上，怎么回

把材料取出来,先用PBS冲洗材料2-3次,然后用0.25%胰酶在37度条件下消化材料30分钟,用吸管轻轻吹打溶液,目的是尽量将贴附在材料上生长的细胞吹打下来,然后收集溶液,如果细胞数量不多,可以再用P

是的.总RNA应该包括mRNA,mRNA前体,核RNA和核糖体RNA.或者换个说法就是编码RNA和非编码RNA.你说的基本正确,但tRNA通常不包括在内.cDNA文库是通过细胞中的RNA反转录得到DN

不可以的.人的皮肤细胞是高度分化的细胞,不分泌胰岛素,也就没有胰岛素MRNA.因为分泌什么蛋白质才合成什么mrna.肝细胞一样的.

大多数真核细胞mRNA的3’端通常具有由20-30个腺苷酸组成的polyA尾巴,寡聚胸腺嘧啶脱氧核糖核苷（OligoT）可以与之配对结合,这就是提取mRNA最基本的原理.具体到实验手段上,现在磁珠法、

蛋白污染可以考虑用酚氯仿多抽提几次,记得吸上清的时候小心点,宁可浪费也别吸到界面.一般后续还需要用氯仿/异戊醇抽提来去除酚.这样基本蛋白污染就可以去干净.实在不行,抽提一次后,就用蛋白酶K消化30mi

提取的时候饱和酚,氯仿需要定量,这些可以去蛋白.去除RNA污染,RNA酶活性,定量.凝胶电泳,试剂最好是即用型的,因为有些东西放久了会长菌.然后是染料的热稳定性和灵敏度.

最好还是不要用DNA试剂盒提取DNA,因为用试剂盒提的260/230普遍都很低,因为里面残留的盐分和碳水化合物太多了,导致A230很大.建议使用传统的酚氯仿提取法!（自己配裂解液,蛋白酶,RNA酶等等

应该会出现很多条带细胞内不仅有mRNAtRNArRNA还有一些小RNA如snRNAsnoRNAscRNA如果再加上线粒体内转录的更多