提取RNA时电泳检测发现在250bp左右存在明亮的条带,但在18s和28s无条带
来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/05/11 00:10:01
很小的,修芬兰相当于300BP,在不到一百BP左右?是一堆的,一看就能看出来的.提质粒提不好经常会有那东西的.
1、在腐乳的制作过程中,毛霉、青霉等微生物合成蛋白酶将豆腐中的蛋白质分解成小分子的肽和氨基酸,脂肪酶可将脂肪分解成甘油和脂肪酸;蛋白酶和脂肪酶的化学本质是蛋白质.2、一个毛霉细胞中的RNA比一个青霉细
要看你引物的设计,如果没有跨一个内含子的话,是不能检测出的.其实有无DNA污染,可以做一个不经反转录的RNA作为对照模板或者RT-PCR引物跨内含子
这个要看条带的位置了,如果是在加样孔附近的话就是蛋白质污染了,你最好把电泳图片附上来,我再给你看看
液氮的温度可以达到零下190多度,研磨时在液氮下操作主要是由于:(1)植物细胞在极低温度时细胞壁会变得很脆,有利于细胞更好的破碎,释放RNA.(2)RNA容易降解,低温可以防止由于研磨产生的热降解RN
加入1/10体积的NaAc(3M)和2ul糖原-80℃或-20℃放置1小时,然后于低温离心机4℃离心(13000rpm、20min),倒掉乙醇(注意不要倒掉沉淀),然后加入500ul75%乙醇溶液洗涤
蛋白污染会在电泳孔有亮带,跑不出来.RNA污染会在最下边,一团弥散的亮带,但DNA如果降解的话也有这种现象.
电泳漆可以检测很多项目的.1、原漆检测:固体份、电导率、灰份、pH值、外观、黏度、比重等.2、工作液检测:固体份、电导率、pH值、P/B比、溶剂量、MEQ、泳透力等.3、涂膜检测:外观、光泽度、硬度、
条带显示的亮度是你一定体积上样量的DNA总量,而你吸光度测定是浓度,两个比较不能说明什么,电泳只是体现有没有和相对其他条带DNA的大小和量
一般加入10-20微升,室温反应10-20分钟即可.RNA酶蛋白质在后续变性沉淀,洗脱时即可去除.
拖尾的出现一般就是DNA已经降解,不过在主带明显的前提下,拖尾并不会影响一般的PCR扩增.如果不理想的话,可以重新提取DNA,建议用惠彤TM磁珠法试剂盒,可以直接进行后续的PCR
首先,看你提取什么RNA,如果你提取血液里面的小RNA那没有条带是正常的,因为小RNA没有结合EB的结构,所以电泳你看不到什么东西.其次,如果你提取细胞总RNA的话,就可能如一楼的朋友回答的那样,但不
电压和电泳时间调整过没有?有没有都跑出去了?你是用什么跑的?以前做过没有?调整一下浓度看看(琼脂糖或者丙烯酰胺的浓度),个人感觉胶没做好的可能比较大.
在两个外显子上设计上下游引物就可以再问:跨外显子是吗?再答:是的,在相邻的两个外显子上就好。
一般在solutionI里加入RNase的.已经提取出来的质粒有RNA污染,如果直接加RNase消化RNA,则在消化后应该使用氯仿抽提去除RNase.然后再使用醋酸钠/异丙醇沉淀回收质粒.其实现在质粒
可在洗脱一步上加上适量RNA酶,37℃温浴1小时.RNA是单链核酸,DNA是双链核酸.参考资料:河南惠尔纳米生物DNA事业部
冰能提供低温环境,降低几乎无处不在的RNA酶的活性,防止其对所提取的RNA的降解!
RNA在提取过程中和保存期间非常容易被RNA酶降解,提取过程得非常小心,保存期间也得加RNA酶抑制剂,不知道紫外分光光度计检测时含量和纯度如何,及时被降解,也应该有拖尾才对,可能是浓度太低,建议加大上
楼上没说清楚,我补充下,模板原液你可以根据你的DNA定量的浓度适当的加TE后,假如等体积的24:1的氯仿/异戊醇重新抽提1到2次,抽提手摇的话20分钟差不多了,然后9000rpm离心10分钟,取上清等
很正常可能是DNA