扩增效率不同就要用另一种双标准曲线法
来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/05/17 05:16:48
如果是用在原核上,没有多大的却别,但是如果用在真核上,cDNA扩增出来的产物就比DNA直接扩增出来的短.因为cDNA是RNA逆转录过来的,而DNA里面除了RNA上面相对的片段还有内含子的片段,在扩增的
相对定量有两种方法.要求扩增效率相同的是ΔΔCt法,因为只有扩增效率相同目的基因与内参基因的Ct值之差才是恒定的值,这是使用这种方法处理数据的前提,所以正式实验之前要进行条件优化,这种方法的优势是不用
你这个情况不需要知道拷贝数目.把样品等比例稀释,比如1:4,或者1:10.至少做4-5个点.PCR后按照相对浓度和扩增的Ct值做曲线,就可以得到扩增效率了.如果要知道拷贝数目,必须有已知浓度的含有该序
楼主你好!这是两个概念功率是说输出的动力大小而效率是说输出动力大小的有效值,一般为:实际功率/最大功率也就是说不同功率的电机,效率有可能相同
liveinanotherlifestyle大意是:换一种生活方式去生活,是指人.如果你的本意指非生命物质,比如"水"等,那可以翻译为:existinanotherway.
我建议你再另外设计几对引物.效率低,最常见的原因就是引物不是很好.
要有梯度浓度,然后以各梯度的扩增结果做标准曲线.这个资料网上很多
是实时定量吗?相对定量deltadeltaCt法的话,即比较内参与目的基因扩增效率是否相同,用Ct值为纵轴,模板cDNA稀释倍数为横轴做拟合曲线,比较目的与内参这两条拟合曲线之间R平方值是否符合要求(
你好,这个要在开始的时候选择“相对定量”模式,软件才会给出扩增效率
把两个目的基因引物浓度和内参引物调成一致的,因为在计算结果时是要和内参基因对比的.
输入功率=P/η=55/0.93=59.14KW55/0.942=58.39KW原来耗电量为59.14*300*24=425808KWh提高效率后耗电量为58.39*300*24=420408KWh可
只要有目的基因的片段存在,无论是质粒还是基因组还是其他类型的DNA片段,都是可以的.
这个很正常,引物本身的结构和模板的结合牢固程度,就会影响扩增的效率,导致扩增出来的片段亮度不同.
因为DNA聚合酶需要结合在双链区域,才能启动后续的脱氧核糖核苷酸的聚合作用.因此需要引物(PCR中是DNA,而生物体内是RNA)来构成双链区,从而使DNA聚合酶识别并结合,启动聚合作用.
扩增效率理论上不可能超过2.计算值超过2,可能是因为PCR效率不高或者不稳定,结果线性度差,导致某个区间的数据点计算出来的扩增效率反而大于2.这样的标准曲线如果作图的话,数据点都不在一条直线上.一般都
刘琨(271-318),字越石,中山魏昌(今河北无极)人.中国西晋时期名将.汉中山靖王之后,美姿仪,弱冠以文采征服京都洛阳,“人称洛中奕奕,庆孙越石”.厕身以帅哥才子闻名的文学政治团体“金谷二十四友”
设一种冷饮单价是2元的为x,另一种0.8元的为y2x+0.8y=20x=(20-0.8y)/2由题意知y必为5,10,15,20.因为x为正整数,且不为0所以当y=5;x=8当y=10;x=6当y=1
1、调整下体系,不要自己配置反应液,最好用商品的MIX,这样各个组分都是最佳的配比.2、三步法改为两步法,退火延伸设置为一步,大部分的温度为60度,这个只是建议,具体看你买的试剂的说明书,会有具体的说
因为Mg2+是DNA聚合酶(Taq聚合酶)的必需激活剂!Mg2+浓度越高,聚合酶活性越强,过强就会出现非特异性扩增!Mg2+浓度越低,聚合酶活性越低,扩增效率也就越低,产物就越少!所以PCR扩增实验,