为啥用M13通用引物P不出条带,用自己片段的引物可以P出来

如果实验目的只是基因型鉴定,对PCR产物无其他要求的话,二聚体并非不能忍受,可以尝试以下方法优化反应条件：1.确定DNA模板为阳性,即确定含有目标序列；2.对退火温度设置温度梯度,琼脂糖电泳检测是否有

可以制品说明pMD18-TVector、pMD19-TVector是一种高效克隆PCR产物(TACloning)的专用载体.这两种载体分别由pUC18、pUC19载体改建而成,在pUC18、pUC19

1.引物设计不够特异,检查你的序列,去BLAST看看.2.退火温度过低,检查你的引物的Tm,检查你的程序设置.

菌落PCR的假阳性高很可能是因为你做PCR的循环数过大,我们实验室一般对于高拷贝数的质粒,循环数不会超过25个,一般用25个.我知道一家做这些,[威斯腾生物].感觉还可以

可能有很多原因,最常见的原因是1.模板不干净,2.引物设计不当,3.退火温度过高,等等

150bp我是用你的引物blast,找到相应的匹配结果.尽管菌种不同,但是对于你的引物而言,有两组序列（JN562715.2；JQ010853.1）均显示PCR结果为150bp,所以你的片段长度很可能

通用引物1492r/F27,pcr后去测序,因为测序软件的自身原因,测出来开头的序列是杂带不准确,如果需要16sRNA的全长,必须做TA克隆,就需要载体的问题了.如果你要求鉴定菌种只到属,完全可以用通

一般引物设计时,要保证有12-15个碱基和模板完全匹配.而且引物的3‘端不能与其他位置配对,不能被封闭,最多封闭3个碱基.上游引物,下游引物,和他们之间尽量减少二聚体.保证GC含量在45-55之间.还

阴性对照的作用就是来判断实验是否有污染的,如果PCR条带和阴性对照都弥散的话,原因应该是污染.污染一般有试剂的污染,也有可能是环境的污染.先说试剂的污染.你设置的阴性对照所用的每一种试剂都存在被污染的

最直接的就是切胶测序.第二个就是设计nestedPCR的引物提高扩增特异性；另外要看你有没有positivecontrol,亮的话说明你要扩增的那段有问题；不亮的话说明你PCR有问题；negative

体系没啥调整的降低退火温度不行的话就换对引物再问：降低了啊，P出很多带，但是没有大小和目的条带相符的，我用的是KOD高保真酶，和选用的酶关系大吗？再答：一般关系不大如果实验室还有别的可以试一下应该是引

原因很多,你是否提到了DNA,可以将你跑的DNA直接跑胶看看,到底有没有条带；PCR扩增的程序有没有问题,或者引物是否有问题,可以找个对照DNA试试,相同扩增条件下,是否扩出条带,如果扩不出来就用可能

PCR产物测序的最大风险是有在凝胶上看起来的一个条带,实际上有多个分子.也就是说长度相似的分子有可能在电泳的时候只有一条带.如果只是进行PCR产物回收,没有进行凝胶分离的过程的话,东西可能更多了.问题

这要具体分析.一种可能是你的PCR产物是非特异性片段,所以长度不一,这可以通过和你预期PCR产物的长度进行比较来判断.另一种可能是该基因在不同情况下有不同的剪接模式（alternativesplici

通用引物就是用这个引物能够扩增出所有这一类的物种中的这一段基因,也就是要么这个基因在很多物种中其相似性很高,基本是百分之百,该基因比较保守,在各物种中（比如你的COII在昆虫中）是一样的；另一种就是该

货币的发展历程是很漫长的,就金属货币来说主要经历了,银本位,金本位,金银复本位,金汇兑本位.用金银作为货币主要是因为,其耐腐蚀,易携带保存,稀有对通胀有自动调节功能……还有黄金本生也具有价值

用质粒上的序列设计引物.不要跨越这两个酶切位点.就是在插入位点的上下游设计引物.这样才是“通用引物”,可以用于所有使用该质粒载体的PCR检测.

如果引物序列,PCR体系,程序,以及所用的物种都和文献一样的话,可考虑两种情况：1.你所参考的文献真实度有待考量.2.你所提取的该物种DNA质量不好.需重新提纯.

我不了解你的实际情况,我给你几条建议：1.可能是内参引物有问题2.你扩增内参基因的PCR条件设计可能有问题,如Tm3.你用的是一块胶吗?加核酸染料了吗?

真想由衷的说一句懒死你,网上到处是,就不自己查.Forward(17mer):5′-(GTTTTCCCAGTCACGAC)-3′（2956-2972）Reverse(17mer):5′-(CAGGAA