设计一个利用阴离子交换柱纯化一个等电点为7.5的蛋白质的实验

来源：学生作业帮编辑：作业帮分类：生物作业时间：2024/05/16 16:02:38

设计一个利用阴离子交换柱纯化一个等电点为7.5的蛋白质的实验
希望能尽快得到答案,感激不尽!

既然是阴离子交换,就要让目标蛋白带负电,那么缓冲液PH就要大于等电点.缓冲体系的选择也很重要,一般用TRIS-HCl,特别是弱阴离子柱不可选用带负电强的磷酸盐缓冲液,否则上样液中被交换的将是磷酸根而不是目标蛋白.一般用NaCl平衡后上样进行离子交换,然后再用较强的阴离子洗脱.
再问：您能说得在具体一些吗？太谢谢您了！！！
再答：例如先用NaCl平衡阴离子树脂，用PH8左右的TRIS-HCl缓冲液溶解样品，然后上样吸附，再用NaCl洗脱，用部分收集器将流出液分管收集，检测每管收集液中目标蛋白浓度及杂质情况。具体操作步骤请参考树脂说明书及有关实验指南、发表的文献等。

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