质粒提取和电泳相关这几天,我将pET-2双酶切后电泳,总是没有条带,而即使直接将pET-2质粒放上去电泳,条带也很微弱.
来源:学生作业帮 编辑:作业帮 分类:综合作业 时间:2024/05/18 10:43:29
质粒提取和电泳相关
这几天,我将pET-2双酶切后电泳,总是没有条带,而即使直接将pET-2质粒放上去电泳,条带也很微弱.质粒我是和目的基因PrGVORF37 一起提的,37没有问题,跑出来是正常的,但是就pET-2不正常,不知道什么原因.我起初怀疑pET-2质粒有问题,又重新提了些质粒,但是结果还是一样,酶切后没有条带,请高手指导下什么原因.Ps:用碱裂解提取的质粒
可是我已经是从15ml菌中提了后用15微升的TE溶解了...我先前是怀疑过提的量少,但是重新提还是这样,15ml只提15微升,这样的浓度还不够,估计哪里有问题。
这几天,我将pET-2双酶切后电泳,总是没有条带,而即使直接将pET-2质粒放上去电泳,条带也很微弱.质粒我是和目的基因PrGVORF37 一起提的,37没有问题,跑出来是正常的,但是就pET-2不正常,不知道什么原因.我起初怀疑pET-2质粒有问题,又重新提了些质粒,但是结果还是一样,酶切后没有条带,请高手指导下什么原因.Ps:用碱裂解提取的质粒
可是我已经是从15ml菌中提了后用15微升的TE溶解了...我先前是怀疑过提的量少,但是重新提还是这样,15ml只提15微升,这样的浓度还不够,估计哪里有问题。
pET系列载体本身不是高拷贝质粒,因此从你说的“直接将pET-2质粒放上去电泳,条带也很微弱”就说明你提取的量就很少,所以显示的比较弱.再酶切以后就更弱了.
建议你从5~10ml比较浓的菌液中再次抽提质粒,首先要达到质粒浓度够高,然后再酶切检测.
建议你从5~10ml比较浓的菌液中再次抽提质粒,首先要达到质粒浓度够高,然后再酶切检测.
单酶切问题单酶切大小约5000bp的质粒pcDNA3.1,电泳总是出现两条带,说是酶切不完全,调整成20ul体系,酶2u
PCR电泳,为什么没有条带啊?
质粒单酶切后电泳只有一条条带,位置比原质粒低一点,请问我这是切没切开啊
为什么我做Western,电泳时预染Marker很值条带也很清晰,但是转膜后膜上条带都没有了
PCR电泳目的条带很浅
如果质粒dna双酶切电泳后,在胶上出现1)没有条带2)一条3)两条4)三条5)多条,都是什么原因?
我提取的DNA电泳后,条带很暗,而自外检测OD值在正常范围内,上样量为2ul,请问为什么
DNA电泳没有图像昨天使用CTAB法提取植物的DNA,提取过程中能看到沉淀,但是稀释溶解后,电泳看不到任何条带,而且电泳
细菌基因组提取,电泳后为什么跑出来3条带?
sds-page电泳时蛋白样品没有跑出条带,
提出来的RNA 电泳检测时没有条带 用的是1%琼脂糖电泳
PCR电泳出现非特异条带原因