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都有哪几种方法避免载体质粒的自环化?
来源:学生作业帮 编辑:
作业帮
分类:
生物作业
时间:2024/05/10 11:55:42
都有哪几种方法避免载体质粒的自环化?
这个要看你是具体如何克隆的
如果你使用的是酶切连接,选择不同黏末端的酶一般不会发生自身环化
如果是平端连接,则需要对载体去磷,也就是碱性磷酸酶处理.此时需要注意你的插入片段两边要有磷酸基团(可以引物合成时添加,也可设计平端的酶如EcoRV自己回来切),否则是连不上的.
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