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免疫组化为什么山羊血清封闭

来源:学生作业帮 编辑:作业帮 分类:综合作业 时间:2024/05/09 08:17:35
免疫组化为什么山羊血清封闭
封闭是血清与非特异性位点结合,以消除非特异性染色,提高目的蛋白的准确性和降低背景.并非所有的免疫组化都由山羊血清封闭,因为一般二抗是羊抗X,所以采用山羊血清,其与使用二抗来源有关.
再问: 那请问血清封闭非特异性位点的同时,会不会封闭特异性位点?
再答: 在封闭液过量的情况下,会小部分封闭特异性位点,但是这种封闭并不是持久的。 非特异性位点即组织中某些可吸附一抗的非目的抗原蛋白,若不封闭,加入的一抗可能与此种位点结合,从而导致非特异性染色。那么加入了血清后,这部分被吸附的抗体被血清中的蛋白所替代,所以封闭后加入一抗,可保证一抗与目的蛋白相结合从而减低背景。 大量蛋白堆积可能对目的抗原有影响,但是加入一抗后,一抗对抗原的竞争结合力大于血清蛋白堆积力从而抵消这种影响。 祝你实验顺利!