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提的细菌DNA总是3条带是怎么回事

来源:学生作业帮 编辑:作业帮 分类:生物作业 时间:2024/05/10 15:21:48
提的细菌DNA总是3条带是怎么回事
我提的是细菌的全基因组DNA,电泳检测时,总是出现3条带。方法如下,
取1.5ml 细菌液体培养物于灭菌EP管中,12000rpm,离心1min,弃去上清液,收集菌体,如果菌体较少可再重复此操作。
2. 加400ul 裂解液(40mM Tris-醋酸,pH7.20mM 醋酸钠,1mM EDTA,1%SDS)。用微量吸管快速吹打,使其混匀。
3. 加200ul 5M NaCl,混匀后,12000rpm,此步骤可重复2次去糖。
4. 将上清液移至另一灭菌EP管中,加入等体积的苯酚:氯仿:异戊醇(25:24:1),温和颠倒混合,12000rpm,离心3min,转移上清液,重复抽提。
5. 加入2倍体积的无水乙醇或异丙醇,沉淀DNA,用70%乙醇洗沉淀块2-3次,室温静止晾干。加入50ul TE缓冲液重新悬浮DNA,于-4℃下保存备用。
细菌DNA总是3条带?考虑其中含有的质粒吧.
一般提取质粒DNA会出现三条带.
告诉你的提取方法 我帮你判断一下