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关于含目的基因受体的筛选的问题

来源:学生作业帮 编辑:作业帮 分类:生物作业 时间:2024/05/23 18:01:04
关于含目的基因受体的筛选的问题
将切割后的质粒和目的基因片段混合,会出现三种情况:质粒自连,目的基因自连,质粒和目的基因连在一起,而利用质粒上的标记基因如四环素的抗性基因进行筛选,只能排除含目的基因自连的受体,不能排除质粒自连的的受体,那为什么书上说没有接纳重组DNA分子的细胞就不能在培养基上生存,含有质粒重组的细胞明明也能生存,那不就无法起到很好的筛选作用了,我不知道是我的想法错了,还是确实存在这么一个情况,
你所说的切割后会出现三种连接情况是使用单酶酶切,这种情况下会使用碱性磷酸酶处理载体,将3‘-OH变为3’-P,3‘-P和5'-P不会形成磷酸二酯键,防止了自环化;另一个比较常用的方法就是使用双酶切,形成不同的末端,也可以防止自环化