什么是反转录-套式聚合酶链反应(RT-nPCR)?
来源:学生作业帮 编辑:作业帮 分类:生物作业 时间:2024/05/10 17:59:08
什么是反转录-套式聚合酶链反应(RT-nPCR)?
RT-nPCR实际叫做反转录-巢式PCR,
反转录PCR就是把RNA提取后反转录成cDNA,并以其为模板进行的PCR反应,通常用于检测某种RNA是否被表达,或者比较其相对表达水平
巢式PCR(nested PCR),是指利用两套PCR引物(巢式引物)对进行两轮PCR扩增反应.在第一轮扩增中,外引物用以产生扩增产物,此产物在在内引物的存在下进行第二轮扩增.由于巢式PCR反应有两次PCR扩增,从而降低了扩增多个靶位点的可能性(因为与两套引物都互补的引物很少)增加了检测的敏感性;又有两对PCR引物与检测模板的配对,增加了检测的可靠性.
所以反转录-巢式PCR就是以cDNA为模板进行的巢式PCR,它和简单的反转录PCR一样是用于检测某种RNA是否被表达,或者比较其相对表达水平,但是特异性更高,可靠性更强.
反转录PCR就是把RNA提取后反转录成cDNA,并以其为模板进行的PCR反应,通常用于检测某种RNA是否被表达,或者比较其相对表达水平
巢式PCR(nested PCR),是指利用两套PCR引物(巢式引物)对进行两轮PCR扩增反应.在第一轮扩增中,外引物用以产生扩增产物,此产物在在内引物的存在下进行第二轮扩增.由于巢式PCR反应有两次PCR扩增,从而降低了扩增多个靶位点的可能性(因为与两套引物都互补的引物很少)增加了检测的敏感性;又有两对PCR引物与检测模板的配对,增加了检测的可靠性.
所以反转录-巢式PCR就是以cDNA为模板进行的巢式PCR,它和简单的反转录PCR一样是用于检测某种RNA是否被表达,或者比较其相对表达水平,但是特异性更高,可靠性更强.
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