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酶切后PCR一条带都没有 但原质粒PCR有条带 为什么

来源：学生作业帮 编辑：作业帮 分类：综合作业 时间：2024/05/22 07:57:25
酶切后PCR一条带都没有 但原质粒PCR有条带 为什么
做MUCIN基因 从扩增、 切胶纯化、 加A 、T载体链接、 转入感受态 到挑克隆鉴定出阳性克隆 最后提质粒 取一部分提出的质粒双酶切 质粒与酶切产物同时跑电泳鉴定 原质粒有条带 可是酶切一条也没有 为什么
什么酶呢?最后酶切组的电泳条带是弥散,是只有质粒条带没有酶切产物条带,还是干脆就是空白?
如果是弥散,最有可能的是所用的酶的反应条件要求比较严格,因为掌握不当而产生了星号活性,导致把质粒切碎了.建议查一下所用酶的酶切条件.
如果是有质粒条带而没有短片段条带,也就是说没切开了.可能酶切位点发生了突变,也可能是酶失活了.
如果是空白...我也不知道怎么回事儿了...再重复一次吧.
如果认为之前的步骤都没什么问题,不如直接送测序.比酶切检验还要精确呢.
祝实验顺利.
单克隆验证,菌液PCR有目的条带的位置,但是质粒PCR后,却没有批出我的目的条带这是为什么呀 【求助】菌落PCR有目的条带与菌液PCR却什么都没有? 转化后菌液pcr有目的条带,然后提质粒和双酶切验证.但是没有得到目的条带. PCR电泳,为什么没有条带啊? 菌液pcr可以拉出目的条带,但是质粒抽出来酶切结果说是没有插进去,为什么? 做PCR以后,跑电泳.结果一条带都没有,为什么 PCR跑电泳每次都有条带但都不亮怎么找原因? PCR结果没有条带,都是弥散的,这是为什么 DNA PCR扩增我想问DNA样品检测中有很亮的特异性条带,但为什么经过PCR扩增却是什么都没有那,试过好多条件都没成功 PCR有扩出来条带,但目的条带不是太亮就有什么原因 RAPD反应,DNA检测有条带,PCR没有条带,请问谁知道原因啊? PCR只有引物二聚体的条带,没有目的基因条带