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电泳无DNA条带,什么原因?

来源:学生作业帮 编辑:作业帮 分类:语文作业 时间:2024/05/03 08:41:45
电泳无DNA条带,什么原因?
DNA提取的过程中,异戊醇沉淀出很多絮状沉淀,但是电泳却跑不出条带,而在最前沿有大团的亮点,想请教下各位那些亮团是什么?为什么会提不出DNA?Marker的条带很清晰哦,我提取的是植物的DNA,用的是嫩叶,用的是CTAB法.
我是在用异丙醇沉淀前加的RNA酶,37℃水浴1h,前面的亮点没有拖尾。如果我提的那个里面是蛋白质,除了加酶,还有什么别的方法除去?我用70%乙醇洗过两次哦。
异戊醇沉淀出很多絮状沉淀(应该是蛋白质多了,最好离心后用70%乙醇洗两次,有条件的话加点蛋白酶K)
在最前沿有大团的亮点(是不是象飞机场跑道那样拖尾得厉害?RNA太多了.有条件的话加RNA酶,没条件的话多洗几次)
根据我的经验,如果其他步骤没问题,很有可能是最后一步加TE时没有溶好,你在混匀器上转一下.还有,最后取样时候注意去中间的,不要取底部(蛋白质多)和上部(DNA浓度低)
抽DNA看似简单,对新手来说还是需要花时间熟悉.多找人问问,最好有前辈带你做一遍,很快的.
补充:抽DNA,并不是沉淀越多效果越好.DNA/RNA肉眼是无法看见的,你看到的沉淀,都是蛋白质.很有可能你的DNA已提出来了,但在染EB时由于量太少被蛋白质和RNA覆盖掉了.
建议你1重跑一次电泳看效果怎么样(有可能是DNA没溶好);2吸取教训重提一次.