电泳无DNA条带,什么原因?
来源:学生作业帮 编辑:作业帮 分类:语文作业 时间:2024/05/03 08:41:45
电泳无DNA条带,什么原因?
DNA提取的过程中,异戊醇沉淀出很多絮状沉淀,但是电泳却跑不出条带,而在最前沿有大团的亮点,想请教下各位那些亮团是什么?为什么会提不出DNA?Marker的条带很清晰哦,我提取的是植物的DNA,用的是嫩叶,用的是CTAB法.
我是在用异丙醇沉淀前加的RNA酶,37℃水浴1h,前面的亮点没有拖尾。如果我提的那个里面是蛋白质,除了加酶,还有什么别的方法除去?我用70%乙醇洗过两次哦。
DNA提取的过程中,异戊醇沉淀出很多絮状沉淀,但是电泳却跑不出条带,而在最前沿有大团的亮点,想请教下各位那些亮团是什么?为什么会提不出DNA?Marker的条带很清晰哦,我提取的是植物的DNA,用的是嫩叶,用的是CTAB法.
我是在用异丙醇沉淀前加的RNA酶,37℃水浴1h,前面的亮点没有拖尾。如果我提的那个里面是蛋白质,除了加酶,还有什么别的方法除去?我用70%乙醇洗过两次哦。
异戊醇沉淀出很多絮状沉淀(应该是蛋白质多了,最好离心后用70%乙醇洗两次,有条件的话加点蛋白酶K)
在最前沿有大团的亮点(是不是象飞机场跑道那样拖尾得厉害?RNA太多了.有条件的话加RNA酶,没条件的话多洗几次)
根据我的经验,如果其他步骤没问题,很有可能是最后一步加TE时没有溶好,你在混匀器上转一下.还有,最后取样时候注意去中间的,不要取底部(蛋白质多)和上部(DNA浓度低)
抽DNA看似简单,对新手来说还是需要花时间熟悉.多找人问问,最好有前辈带你做一遍,很快的.
补充:抽DNA,并不是沉淀越多效果越好.DNA/RNA肉眼是无法看见的,你看到的沉淀,都是蛋白质.很有可能你的DNA已提出来了,但在染EB时由于量太少被蛋白质和RNA覆盖掉了.
建议你1重跑一次电泳看效果怎么样(有可能是DNA没溶好);2吸取教训重提一次.
在最前沿有大团的亮点(是不是象飞机场跑道那样拖尾得厉害?RNA太多了.有条件的话加RNA酶,没条件的话多洗几次)
根据我的经验,如果其他步骤没问题,很有可能是最后一步加TE时没有溶好,你在混匀器上转一下.还有,最后取样时候注意去中间的,不要取底部(蛋白质多)和上部(DNA浓度低)
抽DNA看似简单,对新手来说还是需要花时间熟悉.多找人问问,最好有前辈带你做一遍,很快的.
补充:抽DNA,并不是沉淀越多效果越好.DNA/RNA肉眼是无法看见的,你看到的沉淀,都是蛋白质.很有可能你的DNA已提出来了,但在染EB时由于量太少被蛋白质和RNA覆盖掉了.
建议你1重跑一次电泳看效果怎么样(有可能是DNA没溶好);2吸取教训重提一次.
PCR电泳出现非特异条带原因
DNA电泳图的分析中间两条带是什么
用三氯乙酸-丙酮沉淀法提取杨树蛋白,电泳时无条带,不知道是什么原因,这个实验应该注意什么,
Western blot实验电泳时 Marker条带不清晰,很弥散,无法辨别有几条带,请问什么原因可以导致啊?
提取细菌DNA检测到有条带,PCR后无条带;而基因组DNA检测到无条带的,PCR后却有条带.怎么解释?
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DNA经pcr扩增后电泳出现了三条带是怎么回事?
dna有od值但是凝胶成像无条带是怎么回事?
RAPD反应,DNA检测有条带,PCR没有条带,请问谁知道原因啊?
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