用天根的试剂盒（离心柱法）提DNA,两个样本结果怎么样?是不是有很大问题?

来源：学生作业帮编辑：作业帮分类：综合作业时间：2024/05/26 04:42:23

用天根的试剂盒（离心柱法）提DNA,两个样本结果怎么样?是不是有很大问题?
用天根的试剂盒（离心柱法）提DNA,两个样本结果分别为OD260/280=1.69,浓度97ug/ml；OD260/280=1.7,浓度25ug/ml.希望有高人指点~

基因组DNA的260/280的值一般在1.6-1.8之间.（虽然和洗脱液有关,但一般都偏低）
就是浓度低了点,不过这个和样品、裂解是否充分等等有关.样品应该没问题,继续用.
再问：我今天又提了几个，浓度还是很低，基本都在40ng/ml，请问怎么补救？
再答：可能是裂解不够充分。（组织的话，研磨和破碎一定要充分，细胞的话煮一下也是可以的）但是即使是这么低的浓度，还是能用的吧。
再问：我做的事人血，也可以煮一下吗？多少度煮啊？煮多久？我今天去了500ul血，裂解大约十分钟，需要再久一点吗？
再答：哦，血液的话不是这样的，不用煮。列举几个步骤你自己看一下： 1.没有充分裂DNA和蛋白质，没有通过涡旋振荡充分解离开，然后，离心取上清的时候，没有解离的DNA随着蛋白质沉淀一起被沉淀丢失，就会导致DNA产量低。（不知道天根的试剂盒有没有涡旋这一步，但是原理是一样的） 2.起始DNA含量是否因为血液保存反复冻融本身就低；或者血液样本来自使用免疫抑制剂的病人，血液中淋巴细胞少，提取的DNA浓度也会低些。 40ng/ml？还是40ng/ul？如果是后者，继续往下做pcr什么的这点浓度也够了。
再问：哦，是40ug/ml 没有我选这一步，明天试试找个涡旋振荡的仪器是肿瘤患者的血液，应用化疗可能会引起白细胞减低，可能也有这个原因吧如果我要做多个位点的PCR，这个量也够吗？大约10个位点
再答： pcr的话，pg级的就可以检测出来了，这个量也够了。

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