离子交换层析中,为什么用氯离子洗脱阴离子?为什么改变氯离子浓度就可以分离出带电荷不同的阴离子?
来源:学生作业帮 编辑:作业帮 分类:综合作业 时间:2024/05/25 11:09:39
离子交换层析中,为什么用氯离子洗脱阴离子?为什么改变氯离子浓度就可以分离出带电荷不同的阴离子?
阴离子交换柱的填料是正电填料,在低盐条件下可以通过电荷相互作用吸附样品中的阴离子和负电荷物质(如DNA).这些带负电的物质由于其带电量不同,分子大小不同,因而与正电填料之间的结合力也就不同.用梯度的氯离子(一般用氯化钠梯度,例如从100mM氯化钠线性梯度升高到1M氯化钠)洗脱挂柱样品时,氯离子会和结合上的物质竞争结合正电填料,伴随着氯离子浓度的不断升高,氯离子的竞争作用越来越强,与填料结合的物质会按照亲和力从弱到强依次洗脱下来,形成独立的洗脱峰,从而将这些物质分开.
阳离子交换柱与之正好相反,柱子填料为负电荷,用钠离子洗脱结合的正电物质.
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