夹心法ELISA空白特别大

来源：学生作业帮编辑：作业帮分类：综合作业时间：2024/05/09 20:02:23

夹心法ELISA空白特别大
空白就是加样过程中不加样品只加PBS的孔,捕获抗体和检测抗体分别为兔多抗和鼠多抗,谁能告诉怎么才能降下来,已经试过不同的封闭液,掩蔽剂等没什么效果.

阳性对照呢?
如果二抗质量很差,即效价低、使用浓度高就会如此.建议增加coating、减少1st AB 和2nd Ab的浓度.
再问：阳性对照正常，就是空白值大，酶标二抗是promega的，我现在是用1:10000稀释，质量也应该没问题。。我又试了空白不加检测抗体，因为之前我觉得是我的兔抗和鼠抗之间有些非特异性吸附，结果还是有颜色，只不过颜色相对浅了点，那是不是意味着我的捕获抗体和羊抗鼠酶标二抗有一些非特异性的相互作用啊！是不是说明我的兔抗不太好？求指点。。
再答：还有酶标板也很关键，不同性质的酶标板非特异性吸附不同。可以同时试一试其它公司的酶标板。如康宁、不同国产板做对照试验。我们以前用使用了很多种，最后康宁的最好。

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