作业帮酶切后跑胶怎么会这样?
来源：学生作业帮 编辑：作业帮 分类：综合作业 时间：2024/05/29 03:01:14
酶切后跑胶怎么会这样?
我要做RFLP,PCR产物未经纯化直接酶切,然后跑胶,对照组正常人的结果很好,带型清晰,可到了病例组,酶切后跑胶怎么变成这样子了呢?（见图,白线条处为目的条带）很难确定到底算不算切开了,觉得很混乱,无法判断基因型.这是什么原因造成的呢?应该怎样改正呢?如果要对PCR产物进行纯化的话,用什么方法比较好呢?
三张图均为病例组的.两条带分别是169bp和切开后产生的83/86bp.除此之外的带是怎么造成的呢?
图中有的带很暗,这是怎么回事呢,如果是杂合子的话,两条带不是应该同样亮度吗?或许是酶切不完全造成的?若再做一次的话需要纯化吗?
我要做RFLP,PCR产物未经纯化直接酶切,然后跑胶,对照组正常人的结果很好,带型清晰,可到了病例组,酶切后跑胶怎么变成这样子了呢?（见图,白线条处为目的条带）很难确定到底算不算切开了,觉得很混乱,无法判断基因型.这是什么原因造成的呢?应该怎样改正呢?如果要对PCR产物进行纯化的话,用什么方法比较好呢?
三张图均为病例组的.两条带分别是169bp和切开后产生的83/86bp.除此之外的带是怎么造成的呢?
图中有的带很暗,这是怎么回事呢,如果是杂合子的话,两条带不是应该同样亮度吗?或许是酶切不完全造成的?若再做一次的话需要纯化吗?
病例组是最下面的那块吗?看起来只有倒数第二道在你说的白线条位置有带啊.
而且那些浓度比较低的地方,会不会是因为杂合体的缘故,本来浓度就只有一半.
能不能试着把胶的浓度降低,让带分的再开点.
实验中的这种现象谁也不能很确定的说出什么原因,还是得试.如果你觉得需要纯化,那就纯化一次试试好了!如果觉得酶切不充分,就延长下反应时间!实验细节我也不清楚,建议也只能是很模糊的...
而且那些浓度比较低的地方,会不会是因为杂合体的缘故,本来浓度就只有一半.
能不能试着把胶的浓度降低,让带分的再开点.
实验中的这种现象谁也不能很确定的说出什么原因,还是得试.如果你觉得需要纯化,那就纯化一次试试好了!如果觉得酶切不充分,就延长下反应时间!实验细节我也不清楚,建议也只能是很模糊的...