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单酶切重组DNA有哪些弊端,如何避免
来源:学生作业帮 编辑:
作业帮
分类:
生物作业
时间:2024/05/21 18:02:12
单酶切重组DNA有哪些弊端,如何避免
1.可能发生切完之后,连接时自己又重新连上的现象.
2.插入片段没有方向性,比如插入片段的编码链是atcgatg,可以以这个顺序,也可以反过来连接进去.
避免方法:1.尝试双酶切,电泳分离切下片段和剩余片段.2.仍用单酶切,可以提高插入片段与载体的浓度比,提高插入片段与载体粘性末端的结合概率.
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