做细菌双杂交时为什么要用共转化呢?共转的效率好低啊.可否先把诱饵质粒转进去,做成感受态,再转文库?

来源：学生作业帮编辑：作业帮分类：综合作业时间：2024/05/23 13:05:39

做细菌双杂交时为什么要用共转化呢?共转的效率好低啊.可否先把诱饵质粒转进去,做成感受态,再转文库?
听说这么分两步转,两种质粒就不是1:1了,先转进去的那个拷贝数会多些,于是筛出来的会有很多假阳性.哪位试过分两步转的来说说经验吧,可以代替共转吗?
PS.两种质粒都是低拷贝的

如果两种质粒同时转入细菌效率低的话,可以分两步转化：先转化一种质粒,然后把转化该质粒的细菌做成感受态,再转入另一种质粒,这样的效率会高很多.
转化效率低的一个原因是,制备感受态时细菌超过生长对数期了,变老了,这样对转化效率有很大的影响,尤其是在做双杂交的实验.

切开的质粒能转化进入感受态细菌吗农杆菌感受态细胞制备失败和质粒没有转进去的可能原因为什么只有处于感受态的受体细菌才能被转化根瘤农杆菌感受态制作时污染是怎么回事?转化质粒进去后,长出后是白色不透明的菌落,都不像是农杆菌. 质粒构建的过程中,如果是想把α基因与A质粒重组,但为什么要先与一个B质粒先重组再构建呢? 转化了的质粒的细菌为什么要恢复培养细菌质粒是不是环状DNA?它要是DNA为什么还要做细胞工程的运载体?把它放入细胞里面,细菌的DNA不就也进去了么?而且目把目的基因导入质粒.再把质粒导入细菌内·对于细菌来说怎么是基因重组呢?为什么不是染色体变异呢呢? 质粒和目的基因片段分别双酶切（bamh1,xba1）连接后电转感受态细胞,同时将质粒酶切回收的片段转化做对照影响感受态细胞转化效率的因素有哪些制备感受态细胞时为什么质粒浓度不能过高感受态细菌的名词解释!