标记有丝分裂百分率法是怎么起作用的?在测这个比例的时候怎么看得出来哪些是有丝分裂细胞,哪些是其他期的细胞?
来源:学生作业帮 编辑:作业帮 分类:生物作业 时间:2024/05/15 11:01:58
标记有丝分裂百分率法是怎么起作用的?在测这个比例的时候怎么看得出来哪些是有丝分裂细胞,哪些是其他期的细胞?
其原理是
对测定细胞进行脉冲标记、定时取材、利用
放射自显影技术显示标记细胞
(此处回答后一个问题,通过被对标记物的形态观察可以大致确定细胞染色体/质的形态,从而确定细胞周期),通过统计标记有丝分裂细胞百分数的办法来测定细胞周期.有关名词:
TG1:G1期的持续时间
TG2:G2期的持续时间
TS:S期的持续时间
TM:M期的持续时间
TC:一个细胞周期的持续时间
PLM:标记的有丝分裂细胞所占的比例TDR:胸腺嘧啶核苷,是DNA的特异前体,能被S期细胞摄入,而掺进DNA中.通常使用的是3H或者 14C标记的TDR.
(现有研究证实TDR掺入过程归属于补救途径,而非从头合成途径,因此添加对于这两种途径有影响的药物可能影响最终结果——不过在通常情况下,都被视为理想状态)
测定原理:(第一个问题的答案)
① 待测细胞经3H-TDR标记后,所有S期细胞均被标记.
② S期细胞经G2期才进入M期,所以一段时间内PLM=0.③开始出现标记M期细胞时,表示处于S期最后阶段的细胞,已渡过G2期,所以从PLM=0到出现PLM的时间间隔为TG2.
④ S期细胞逐渐进入M期,PLM上升,到达到最高点的时候说明来自处于S最后阶段的细胞,已完成M,进入G1期.所以从开始出现M到PLM达到最高点(≈100%)的时间间隔就是TM.
⑤ 当PLM开始下降时,表明处于S期最初阶段的细胞也已进入M期,所以出现PLM到PLM又开始下降的一段时间等于TS.
⑥ 从PLM出现到下一次PLM出现的时间间隔就等于TC,根据TC=TG1+TS+TG2+TM即可求出的TG1长度.
对测定细胞进行脉冲标记、定时取材、利用
放射自显影技术显示标记细胞
(此处回答后一个问题,通过被对标记物的形态观察可以大致确定细胞染色体/质的形态,从而确定细胞周期),通过统计标记有丝分裂细胞百分数的办法来测定细胞周期.有关名词:
TG1:G1期的持续时间
TG2:G2期的持续时间
TS:S期的持续时间
TM:M期的持续时间
TC:一个细胞周期的持续时间
PLM:标记的有丝分裂细胞所占的比例TDR:胸腺嘧啶核苷,是DNA的特异前体,能被S期细胞摄入,而掺进DNA中.通常使用的是3H或者 14C标记的TDR.
(现有研究证实TDR掺入过程归属于补救途径,而非从头合成途径,因此添加对于这两种途径有影响的药物可能影响最终结果——不过在通常情况下,都被视为理想状态)
测定原理:(第一个问题的答案)
① 待测细胞经3H-TDR标记后,所有S期细胞均被标记.
② S期细胞经G2期才进入M期,所以一段时间内PLM=0.③开始出现标记M期细胞时,表示处于S期最后阶段的细胞,已渡过G2期,所以从PLM=0到出现PLM的时间间隔为TG2.
④ S期细胞逐渐进入M期,PLM上升,到达到最高点的时候说明来自处于S最后阶段的细胞,已完成M,进入G1期.所以从开始出现M到PLM达到最高点(≈100%)的时间间隔就是TM.
⑤ 当PLM开始下降时,表明处于S期最初阶段的细胞也已进入M期,所以出现PLM到PLM又开始下降的一段时间等于TS.
⑥ 从PLM出现到下一次PLM出现的时间间隔就等于TC,根据TC=TG1+TS+TG2+TM即可求出的TG1长度.
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