关于蓝白斑筛选的遇到的问题

来源：学生作业帮编辑：作业帮分类：综合作业时间：2024/05/23 20:36:01

关于蓝白斑筛选的遇到的问题
我用的是DH5α甘油菌和PUC19做蓝白斑筛选,做了几次实验,（培养基是LB固体培养基,内含氨苄抗生素,等凝固之后在表面涂上X-gal和IPTG,涂好后且在一天内使用,不会久存）,发现克隆细胞没有蓝斑只有白班,我开始以为是连接效率很高以致无自连质粒菌,但是后来拿空质粒转化这个甘油菌,居然也只有白斑没有蓝斑.放在4度冰箱显色几个小时没有变化.这就很奇怪了,按道理来说应该全部是蓝斑才是.请问到底哪里出了问题呢?是实验设计不对么?
最后补充一点,那个试剂应该是没有问题的.我新买的,尤其是质粒从不同公司买了两次新的.

首先X-gal要避光保存,以免失效；其次培养时间确定够吗?我们前两天做的,也全是白斑,又培养了四个小时,总共20h,就有蓝斑出现了（我用的是大肠杆菌）

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