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SDS-PAGE 中所用蛋白 Marker 的制作方法,最好详细点,

来源:学生作业帮 编辑:作业帮 分类:综合作业 时间:2024/05/11 03:29:48
SDS-PAGE 中所用蛋白 Marker 的制作方法,最好详细点,
这个说起来就麻烦了,一般的个人,没有色谱之类的很难做.或者做出来成本太高.
目前有两种方案,一种是买来纯化好的蛋白(SDS-PAGE级别的)自己混合就行了.这种方法简单,但成本高,这种蛋白比较贵.只有少量的蛋白,如BSA,一般的便宜货可以达到SDS-PAGE级(电泳只有一条带).其他的很难.
另一种是自己纯化了,一些粗品自己用离子交换等其他的方法纯化.有些可能得经过几次纯化才能得到理想的蛋白.
如果你是公司,自己想做蛋白 Marker ,后一种方法当然是首选,但得自己摸索,如果是自己用一用,买现成的蛋白 Marker 最合算了.
或者你用量虽然大,但只要其中一两个条带,可以订购那种纯化好的蛋白.
再问: 你好,谢谢指点,纯化之类的设备都有,所以想自己纯化;但是不知道纯化后纯度合格的蛋白是否需要其他特殊处理呢,比如乙酰化,还有其他的注意事项吗?谢谢!
再答: 做蛋白Marker不用乙酰化,如果你想要预染的,可能得进一步处理,但这个预染的,得用一种特殊的染料。如果只是做普通的Marker,纯化合格就行了。
再问: 哦,谢谢了,对了,请问有相关这方面的文献或其他资料吗,能否推荐下
再答: 这个基本上是不会有的,关于工艺的改进等,只有企业才会去做,而企业做了也不会报道出来。科研人员干这个,也出不了高质量的论文。所以…… 从别的公司挖一个人过来(购买技术也行)。或者从别的渠道想想办法。