作业帮 > 综合 > 作业

在RQ-PCR中,管家基因的引物应如何设置?

来源：学生作业帮 编辑：作业帮 分类：综合作业 时间：2024/05/26 07:26:29
在RQ-PCR中,管家基因的引物应如何设置?
housekeeping gene的引物设计与你想探测的目标基因引物设计方法相同,而且一般文献上都应该给出,遵照文献使用即可,一般问题都会出在目标基因的引物设计上.不过在q-PCR中,housekeeping gene 引物还需注意以下几点
1.首先找到合适的housekeeping gene,其表达应具有一致可参考性.
2.引物长度在17-22bp.
3.引物退火温度在57°-60°之间,并且各个引物之间的退火温度差异不能超过1°.
4.引物所扩增基因的大小在50-400bp间,通常不超过200bp为宜.
5.引物本身无自身折叠,或者两引物之间互补的情况存在.
6.引物设计所扩增的目标基因,最好是跨越两段外显子的区域,这保证引物所扩增的基因,全部来自mRNA转化的cDNA,而非基因组DNA.
做RT-PCR的时候为什么要设置标准反应体系和管家基因反应体系? 为什么在基因克隆中,除开设计PCR引物还要设计表达基因引物? 做RT-PCR内参的作用是什么?应该如何选择管家基因啊? 做RT-PCR内参的作用是什么?应该如何选择管家基因 PCR中引物如何设计, 关于PCR克隆基因的引物问题 请问在PCR实验中,如果不知道模板DNA的核酸序列的情况下如何设计PCR引物? pcr中引物的作用 在高中阶段,PCR技术中引物的作用是什么 如何设计rt-pcr 引物?怎样鉴别基因内的intron and extron? pcr扩增中,如何设计引物? 根据GenBank中p53基因的部分序列),设计引物,确定RT-PCR的参数,检测 p53基因在血细胞中的表达情况.