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ELISA 标准曲线横坐标可以是OD值吗?

来源:学生作业帮 编辑:作业帮 分类:综合作业 时间:2024/05/24 04:04:46
ELISA 标准曲线横坐标可以是OD值吗?
如果横坐标是浓度,纵坐标是OD值,最终得出的方程还得解方程,求出X的值.这样不是更麻烦吗?如果横坐标是OD值,电脑得出的拟合方程就直接可以用于运算了,不是更好吗
另外,用EXCEL做拟合曲线,选几阶方程是最优的?
我只对前一个问题比较有把握:楼主的想法是对的,改换坐标系的选取不会改变浓度与吸光度的关系,两种方式所得结果应无差别.
后面一个问题我其实对其中的数学原理理解很浅显,个人的理解如下:在理想状态下,标准曲线呈线性关系,则一阶方程即可以完美拟合.真实情况常常不完美,容易出现低浓度区间接近最低检出限而趋向平缓,以及高浓度区间接近显色反应信号饱和而趋向平缓的情况.为了拟合,使用二阶方程较为合理.如果二阶方程都不能够很好地拟合,则我会怀疑实验结果的可靠性,此时,即使提高阶数,仍能够提高拟合,但对得到可靠的标准曲线毫无帮助.即是说,此时你的方程对你这条标准曲线的拟合是很好的,但你这条标准曲线对你其他数据浓度/吸光度的关系的反映很可能是不准确的.
以上的分析并不是很有信心,因为我曾使用过软件中建议的拟合计算方式,与以上完全不同,可能也不是excel能够完成的.不管怎样,楼主有兴趣可以去研究一下:我在这里链接贴不了,以上截图来自bio-rad.需要的话楼主可以搜索以上标题关键字,也可以私信我.