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引物设计基本原则是什么?

来源:学生作业帮 编辑:作业帮 分类:生物作业 时间:2024/05/25 11:31:12
引物设计基本原则是什么?
引物设计的原则和试验目的是相关的.
如果是为了检测某一个片段有没有,那么只要考虑特异性和片段好不好扩就行了.一般片段大小控制在500bp左右,上下游引物在57-57度退火温度,引物互补情况不严重,不如不超过5个,单引物没有发卡结构,那么这样的引物就比较好用了.
但是如果是为了克隆基因,那么片段大小就固定了,我们只能在特定的一小段上设计上下游引物,只能尽量的在引物长度(尽量控制在21-25bp)、GC含量(尽量控制在40%-60%)等方面综合考虑.
引物设计的好,PCR的难度就降低了;引物设计的不好用,后续试验会有很大的难度.
如果有具体问题,可以逐一的提出具体的问,问的太笼统了不好回答.
祝你好运!不要太依赖软件.