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关于基因工程中的自身环化!

来源:学生作业帮 编辑:作业帮 分类:生物作业 时间:2024/05/22 01:31:08
关于基因工程中的自身环化!
为什么限制酶不同就可防止呢!
因为不同的限制性内切酶可以切出来不同的粘性末端,末端都不同,自连的概率就很很很低了
再问: 只要一端碰上就行了啊
再答: 那种是非粘性末端的情况,粘性末端是指经酶切后回切出来3、5个未配对的碱基,不同的酶切出来的粘性末端不同,也就是这几个碱基不同,当然不能配对连了,你可以搜个KpnⅠ和CalⅠ这两种酶,说明书上都会画出来酶切位点的,你一看就明白了
再问: 切出两个片段,KPN1切的那端相同,那这两段碰上不就行了吗,或者另外两段 比起全相同末端概率也少不了多少啊
再答: 这种情况是存在的,但存在一个概率问题,片段越短越不易自连,片段越长越容易自连,对于一个质粒来说,一般进行构建时通常会选择两个酶切出一条长的一条短的,这种自连的概率是最低的,而且在酶的持续作用下连接的概率会更低。当然自连的情况是不可避免的,所以才要进行电泳胶回收等后续步骤啊