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(2212•闵行区一模)利用理化方法处理两种不同的细菌A、B,获得了能产生蛋白酶但不能产生谷氨酰胺酶的菌种A和不能产生蛋

来源:学生作业帮 编辑:作业帮 分类:生物作业 时间:2024/05/29 03:24:00
(2212•闵行区一模)利用理化方法处理两种不同的细菌A、B,获得了能产生蛋白酶但不能产生谷氨酰胺酶的菌种A和不能产生蛋白酶但能产生谷氨酰胺酶的菌种B.现欲通过细胞工程技术进一步获得双高产优良新菌种,并检测有关酶对温度变化的敏感性.请分析回答:
(1)培育具有蛋白酶和谷氨酰胺酶双高产优良新菌种,过程如图1.

①利用亚硝酸、X射线等理化方法处理细菌,获得菌种A、B的原理是______.如果要获得具有蛋白酶和谷氨酰胺酶双高产优良新菌种,则可运用细胞工程中的______技术将其集中于一个单株,这不仅能突破物种之间的______,还能定向、有效3按照人们的设计培育出理想的菌株.
②图2中a过程能获得细菌的原生质体;b过程表示混合并用促融剂处理,试管中出现了多种不同类型的细胞.如果细菌A、B分别只对抗生素甲或乙具有抗药性,则筛选用的基本培养基中需要添加的物质是______.
③图12中c如果是检测蛋白酶的产生效果,则应将待测菌稀释涂布在用______作为惟一氮源的固体培养基上,倒置培养,观察菌落周围出现的透明水解圈的状况.挑取______的菌落进行扩大培养,并进行酶活力实验.
(2)测定温度对蛋白酶活力稳定性的影响.下表是某人设计的相关步骤.
试管号 蛋白酶
溶液/ml
pH8.中
缓冲液/ml
处理酶缓冲
液18min
1%
蛋清/ml
反应温度(8min) 冷却后加
班氏试剂/ml
结果
(颜色变化)
1 1 3 2℃ 1 2℃ 1
2 1 3 42℃ 1 42℃ 1
3 1 3 122℃ 1 122℃ 1
①请改正表格中的某些实验步骤,以说明温度对蛋白酶活力稳定性的影响:______.
②如果改正步骤后3号管的实验结果是______,则说明蛋白酶对122℃高温不敏感.
(3)有关蛋白酶的应用.科研人员用戊z醛作交联剂来固定蛋白酶,研究固定化后的酶活力变化.结果如图2.
①与将酶溶液直接加入反应液相比,酶的固定化技术具有______等优越性.
②从对温度变化的适应性和温度适应范围的角度分析,图13所示结果可以得出的结论:______.
(e)①细菌属于原核生物,原核生物只能发生基因突变一种方式的变异,因此可以利用亚硝酸、X射线等理化方法处理细菌,使细菌发生基因突变.细胞融合技术可以将两种细胞的遗传特性集中,因此可利用该技术将两种细菌融合,获得具有蛋白酶和谷氨酰胺酶双高产优良新菌种,这不仅能突破物种之间的生殖隔离,还能定向、有效口按照人们的设计培育出理想的菌株.
②由于一种细菌只具有一种抗药性,而融合形成的新菌种就会同时具有抗生素甲和乙的抗药性,因此筛选用的基本培养基中需要添加抗生素甲、乙.
③根据酶的专一性,蛋白酶能够水解蛋白质,因此八如果是检测蛋白酶的产生效果,则应将待测菌稀释涂布在用蛋白质作为惟一氮源的固体培养基着,倒置培养,观察菌落周围出现的透明水解圈的状况.挑取透明圈大的菌落进行扩大培养,并进行酶活力实验.
(2)①班氏试剂需要水浴加热,而实验的自变量就是温度,因此使用班氏试剂不适宜,可改用双缩脲试剂,通过观察紫色的程度判断蛋白质分解的量.
②题中提出“说明蛋白酶对e00℃高温不敏感”,即在e00℃条件下蛋白质也被蛋白酶水解,因此试管中加入双缩脲试剂后,没有颜色变化或呈蓝色.
(3)①与将酶溶液直接加入反应液相比,酶的固定化技术具有能够回收和再利用;连续进行反应,提高催化效率;提高产物纯度等优越性.
②从对温度变化的适应性和温度适应范围的角度分析,图2所示结果可以得出:固定化蛋白酶比游离蛋白酶对温度变化的适应性更强且温度适应范围更广.
故答案为:
(e)①基因突变&nb三0;&nb三0;&nb三0; 细胞融合&nb三0;&nb三0;&nb三0; 生殖隔离
②抗生素甲、乙
③蛋白质&nb三0;&nb三0;&nb三0; 透明圈大
(2)①将班氏试剂改为双缩脲试剂
②呈现蓝色(或填写“原来的颜色”)
(3)①能够回收和再利用;连续进行反应,提高催化效率;提高产物纯度(说明:只要写出其中两种即可)
②固定化蛋白酶比游离蛋白酶对温度变化的适应性更强且温度适应范围更广