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3.下表为5种限制性核酸内切酶( 以下简称“限制酶”)的识别序列和切割位点(箭头位置),

来源:学生作业帮 编辑:作业帮 分类:综合作业 时间:2024/05/10 06:13:19
3.下表为5种限制性核酸内切酶( 以下简称“限制酶”)的识别序列和切割位点(箭头位置),

 
    某线性DNA分子含有4个B amH I的识别序列、4个Bst I的识别序列,3个 BgI II的识别序列;据此判断下列叙述中,正确的是
        A.该DNA分子能被Sau3AI切成12个片段
        B.一种特定序列只能被一种限制酶识别并在特定位点被切割
        C.两个能够互补配对的DNA片段所具有的粘性末端一定相同
        D.用BgI II、BamH I两种限制酶和DNA连接酶对该DNA分子进行反复切割、连接操作,若干循环后,BamH I的识别序列将少于4个
应该选D
C的答案比较难理解,大家都知道不同的酶产生的粘性末端可以相同,所以D的答案很容易理解,如BgI II、BamH I两种限制酶.但也有些酶比较特殊,同种酶切出来的粘性末端是不一样的,如BbvC
根据限制酶切割的特点,可将它们分为两大类:一类是切割部位无特异性的;另一类是可特异性地识别核苷酸序列.这种能被特异性识别的切割部位都具有回文序列,也就是在切割部位,一条链正向读的碱基顺序与另一条链反向读的顺序完全一致.
有一些限制酶的识别序列不是对称的,如 AccBSⅠ 和BssSⅠ
AccBSⅠ CCG↓CTC BssSⅠ C↓TCGTG
GGC↑GAG GAGCA↑C
有一些限制酶可识别多种序列,如 AccⅠ 识别的序列是 GT↓MKAC ,也就是说可识别 4种序列,其中两种是对称的,另两种是非对称的.
有一些限制酶识别的序列呈间断对称,对称序列之间含有若干个任意碱基.如AlwNⅠ 和DdeⅠ,它们的识别序列如下.
AlwNⅠ CAGNNNC↓TG DdeⅠ C↓TNAG
GT↑CNNNGAC GANT↑C
限制酶在特定切割部位进行切割时,按照切割的方式,又可以分为错位切和平切两种.
(1)识别位点为回文对称结构的序列经限制酶切割后,产生的末端为匹配粘端,亦即粘性末端,这样形成的两个末端是相同的,也是互补的.
(2)平末端在回文对称轴上同时切割 DNA 的两条链,则产生平末端
(3)非对称突出端
许多限制酶切割 DNA 产生非对称突出端.当识别序列为非对称序列时,切割的DNA 产物的末端是不同的,如 BbvCⅠ,它的识别切割位点如下.
-CC↓TCAGC- 产生的粘性末端为 -CC 和 TCCAGC-
-GGAGT↑CG- -GGAGT CG-
有些限制酶识别简并序列,其识别的序列中有几种是非对称的.如AccⅠ,它的识别切割位点如下,其中GTAGAC和 GTCTAC 为非对称.
GT↓AT/CGAC
CATA/GC↑TG